（1）从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 mlYPD液体培养基，30℃，250 rpm培养过夜；（2）测定过夜培养物的OD600值为3.0～5.0之间；（3）将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2～0.4；（4）在28～30℃摇床中继续培养3～6hr，使其OD600值达到0.6～1.0；（5）于室温1...

配制0.67%硫代巴比妥酸溶液，首先需准确称取硫代巴比妥酸，其质量应为溶液总体积乘以所需浓度（即0.67%），假设配制100mL溶液，则需称取约0.67g硫代巴比妥酸。随后，将称取的硫代巴比妥酸加入适量的蒸馏水中，边搅拌边溶解，直至完全溶解无沉淀...

1）将转化用酵母菌株的单菌落接种于5ml YPD培养基中，30度过夜培养至饱和。2）转化前一天晚上，在装有500ml YPD培养基的2L无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液，于30度剧烈振摇，直到细胞密度达1*10的8次方（OD600约为1.3-1.5）。3）于4度4000g离心收获培养细胞，细胞用80ml无菌水重悬。为了增加细胞对...

用分光光度计测量培养48h的酵母培养物在600nm的OD值，稀释起始OD值在 0.1-0.2，然后分装到多个小瓶子，放到30摄氏度摇床，培养到想要的OD值。参考视频链接： https://www.bilibili.com/video/BV1kx41157m9?p=1&share_medium=android&share_plat=android&share_session_id=ad9fc7cf-5335-48a5-b1...

(1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 mlYPD液体培养基，30℃，250 rpm培养过夜；(2)测定过夜培养物的OD600值为3.0～5.0之间；(3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2～0.4；(4)在28～30℃摇床中继续培养3～6hr，使其OD600值达到0.6～1.0；(5)于室温1500g离心...

于30℃过夜培养5 ml酿酒酵母至OD600为0.5左右,扩大培养至50ml,再生长4h后,5000×g离心8min收集细胞。以20ml无菌水洗,然而把离心收集的酵母以10ml新配的LiAc溶液100mmol/L(用pH 8.0的Tris 10mmol/L、 EDTA 0.1mmol/L 缓冲液配制)洗1次。7000×g离心8min后,最终将酵母细胞悬于0.5ml的LiAc溶液中。50μl的...

半乳糖）和成长为16-18 h ，直至OD600 = 0.8 - 1.2 。此外，转化生长的 固体YPD培养基（ 1.5 ％琼脂）补充 300微克/毫升geneticin （ G418 ） 。代spheroplasts和染色质 水解微球菌核酸。酵母细胞 9 （ 1 × 10 ） ，收集离心，洗涤 与无菌水和缓冲液（ 10毫米的Tris -盐酸，pH值7.4...

感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞，吸收周围环境中的DNA分子，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。 主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大，直观的说，使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性，这种孔洞会被细胞自身所修复。主要原理 通过...

培养步骤:1)100 μl过夜菌液(5615宿主菌)加入5mlTB培养基中,37℃振荡培养至OD600为0.5,加1mM IPTG,振荡30min。2)1.6μl T7噬菌体文库液与1.6ml菌液混合,取混合液1ml,加入5ml顶层琼脂糖,倒入9公分LB/氨苄青霉素(50μg/ml)琼脂平板,旋窝式混匀,顶层琼脂糖平铺。 关键词:[噬菌斑 琼脂糖 菌液 培养基 宿...

(1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 mlYPD液体培养基，30℃，250 rpm培养过夜；(2)测定过夜培养物的OD600值为3.0～5.0之间；(3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2～0.4；(4)在28～30℃摇床中继续培养3～6hr，使其OD600值达到0.6～1.0；(5)于室温1500g离心...