怎么用分子生物学方法鉴定db/db小鼠

发布网友发布时间：2022-05-26 02:22

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热心网友时间：2024-12-01 10:19

具体的设计方案很难说清楚。大致思路如下：
抽提基因组DNA，设计特异性引物，进行PCR鉴定，正常小鼠作为阴性对照。
引物需要设计在导致db/db小鼠糖尿病的基因上。
由于是遗传学改造的小鼠，DNA的组织来源应该没有讲究，随便找点组织抽提DNA即可。追问我明白的，但是我想知道有没有具体资料讲被突变掉的这个基因的信息，要不怎么设计引物呢？

追答http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore?term=lepr
以上网址是用 "lepr"作为关键词在NCBI上搜到的lepr突变序列，里面含有lepr的序列链接中有关于db/db小鼠是如何改造的文章，我没有仔细看，不过应该是以下2篇是关于原始的db/db小鼠如何改造的：
（1）AUTHORS Mandel,M.A. and Mahmoud,A.A.
TITLE Impairment of cell-mediated immunity in mutation diabetic mice
(db/db)
JOURNAL J. Immunol. 120 (4), 1375-1377 (1978)
PUBMED 347001
REFERENCE 10 (bases 1 to 5571)

（2）AUTHORS Coleman,D.L.
TITLE Obese and diabetes: two mutant genes causing diabetes-obesity
syndromes in mice
JOURNAL Diabetologia 14 (3), 141-148 (1978)
PUBMED 350680
至于哪篇文献或那条序列对你又用，我也不清楚。不过既然要设计实验方案，也需要自己摸索和学习，你自己找找看吧。需要查找序列的时候，记得用NCBI，我已经替你做了一半的搜索工作，接下来看你自己了。