hepg2细胞siRNA转染条件?哪位大神指点一下。

发布网友发布时间：2022-05-10 17:23

共2个回答

热心网友时间：2023-10-18 19:25

之前我们用过Lipo，说明书上要求细胞的密度在70%左右，同时在转染后的4-6小时注意要换培养液，后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent，细胞密度在45%左右 ,设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度最好做2个复孔，一般做转染前一天铺板，用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基必须是无血清培养基，因为血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，并且影响转染效率。转染后48h收细胞做qPCR基因水平检测或者转染后72h收细胞提蛋白做western Blotting蛋白水平检测。

热心网友时间：2023-10-18 19:25

hepg2比较难转直接用lipo也可以就是效率低一点最高效的还是构建病毒载体侵染吧电转的话效率也还行