CHO细胞的DHFR系统是根据什么原理设计的呢?

发布网友发布时间：2022-04-21 18:48

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热心网友时间：2022-07-11 19:54

这里的CHO细胞是指DHFR缺陷型的细胞，不含二氢叶酸还原酶基因，不能合成核酸，必须在含有HT的培养基里生长。
当转染的目的基因连有dhfr基因时，阳性细胞也就获得了dhfr基因。MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂，可阻碍其作用。当细胞培养基内含有MTX时，二氢叶酸还原酶被抑制，通过反馈调节。使得该基因自我扩增，连带其上下又100-1000kb的基因都会扩增。如此目的基因也得到扩增，即可提高目的蛋白的表达量。

热心网友时间：2022-07-11 19:55

DHFR是指二氢叶酸还原酶，CHO-DHFR细胞是二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型CHO细胞，在缺乏DHFR的情况下无法生长，可以转染表达DHFR的质粒进入该细胞系，这样，转染成功的细胞才能存活，其他细胞死亡，可以作为稳定细胞系构建的筛选系统追问CHO细胞的GS系统筛选和DHFR系统筛选可以结合起来吗？
哪个系统筛选的速度更快？