16SDNA测序问题

发布网友发布时间：2022-05-11 08:54

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热心网友时间：2023-10-09 17:32

空载，一个是没有片段插入。一个是培养过程中片段丢失。第二种不需特殊条件培养一般发生的可能性比较小。PCR鉴定易受外界环境条件影响，一般建议使用酶切鉴定。假如酶切鉴定没有问题那您可以使用扩增引物测序或者目的片段上引物进行测序，如若有插入片段可以得到测序结果，如若无片段结果为模板与引物不结合.这样可以排除您实验问题.如您怀疑测序问题可以进行验证，验证方法一般为：取您的原始菌液重新接菌提取质粒进行测序反应，结果一致将收取两次费用，结果不一致将收取正确费用.至于测通序列不是所要序列可能您插入片段与预期不一致。造成原因：一是：PCR扩增中出现错误，克隆到载体中发生突变。二是：测序准确性.测序准确性您的片段1500BP双向测序可以排除测序准确性问题.且可以找到您的引物序列，至于片段大小相同在PCR条带检测时碱基相差10个左右肉眼是无法分辨的.因此克隆后的片段一致也就正常了.您可以使用PCR测序.如若测序有片段结果存在疑问也可以安排验证实验.以上供您参考！

热心网友时间：2023-10-09 17:32

博凌科为-为你解答：可不可以换个公司测一下，通过这几个月的实验，个人感觉有很多公司很不负责，真是很郁闷。我做过16S，实在北方基因组中心测的，你看看可不可以