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细胞划痕实验怎么做?居然如此简单,不用手动观测拍照了

发布网友 发布时间:2024-10-22 22:13

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热心网友 时间:2024-10-26 11:44

细胞划痕实验的步骤其实相当直观和简单。首先,准备无菌超净工作台上的必要工具,如6孔板、离心管、记号笔、吸管筒等,确保所有物品清洁无污染。在6孔板的底部,用记号笔均匀画出间距0.5-1cm的横线,每孔至少三道。

将划痕所需的细胞消化并转移到离心管中,进行离心分离,然后用细胞计数仪或经验判断细胞密度。接下来,去除上清,加入培养液,以5x10^5个细胞/孔的密度接种到6孔板,包括对照组的两个板子。

补加培养液,摇匀后标记并培养,期间可以选择使用实时监测仪监控细胞生长,或者定时手动观察至汇合度达到80%时进行划痕操作。划痕时使用20μL枪头垂直于黑线划痕,然后清洗并更换新鲜低血清培养液。

重复PBS清洗,去除划痕细胞,更换新培养液,再轻轻摇匀。将6孔板放入培养箱,观察并记录划痕愈合过程。若无实时监测仪,需人工在不同时间点(0h、6h等)取出细胞,显微镜下观察并拍照分析。

这个实验过程不需要过于复杂,清晰的步骤和适当的观察就能完成,让实验更高效。完成实验后,你可以根据记录的数据进行分析和研究。
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