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His标签单抗His标签鼠单抗

发布网友 发布时间:2024-10-14 02:06

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热心网友 时间:2024-10-14 02:15

以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗被称为His标签鼠单抗。其制备方法通常包括人工合成特定序列的多肽,即氨基酸序列为HHHHHH的多肽,根据需要在多肽末端添加用于偶联载体的特殊氨基酸。合成完成的多肽通过化学方法与载体蛋白(如KLH、BSA、OVA等)偶联,随后将偶联后的全抗原免疫实验小鼠。免疫过程结束后,通过无菌方式取出免疫成功的小鼠的脾脏,与骨髓瘤细胞进行融合。通过ELISA或其他筛选手段,从融合细胞中筛选出阳性克隆。筛选得到的细胞经过进一步克隆化,形成稳定的细胞株。将这些细胞株在体外培养或小鼠体内诱导产生腹水,然后从培养基或腹水中纯化,即可得到His标签鼠单抗。最后,使用Western blot或其他方法进行鉴定以确保其有效性。

目前,全球有多家公司提供商品化的His标签单抗。例如,Proteintech Group的His标签单抗(产品编号66005-1-Ig)展示了其出色的性能。在1分钟的曝光时间内,即使将抗体稀释至16万倍,仍能检测到很强的信号,这表明其敏感性和特异性都达到了相当高的水平。

总结而言,His标签鼠单抗的制备是一个复杂而精细的过程,旨在通过实验小鼠产生针对特定His标签的抗体。通过一系列的步骤,包括多肽合成、偶联、免疫反应、筛选、克隆化和纯化,最终获得的His标签鼠单抗能够满足多种生物研究和临床应用的需求,展现出极高的特异性和敏感性。

热心网友 时间:2024-10-14 02:16

以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗被称为His标签鼠单抗。其制备方法通常包括人工合成特定序列的多肽,即氨基酸序列为HHHHHH的多肽,根据需要在多肽末端添加用于偶联载体的特殊氨基酸。合成完成的多肽通过化学方法与载体蛋白(如KLH、BSA、OVA等)偶联,随后将偶联后的全抗原免疫实验小鼠。免疫过程结束后,通过无菌方式取出免疫成功的小鼠的脾脏,与骨髓瘤细胞进行融合。通过ELISA或其他筛选手段,从融合细胞中筛选出阳性克隆。筛选得到的细胞经过进一步克隆化,形成稳定的细胞株。将这些细胞株在体外培养或小鼠体内诱导产生腹水,然后从培养基或腹水中纯化,即可得到His标签鼠单抗。最后,使用Western blot或其他方法进行鉴定以确保其有效性。

目前,全球有多家公司提供商品化的His标签单抗。例如,Proteintech Group的His标签单抗(产品编号66005-1-Ig)展示了其出色的性能。在1分钟的曝光时间内,即使将抗体稀释至16万倍,仍能检测到很强的信号,这表明其敏感性和特异性都达到了相当高的水平。

总结而言,His标签鼠单抗的制备是一个复杂而精细的过程,旨在通过实验小鼠产生针对特定His标签的抗体。通过一系列的步骤,包括多肽合成、偶联、免疫反应、筛选、克隆化和纯化,最终获得的His标签鼠单抗能够满足多种生物研究和临床应用的需求,展现出极高的特异性和敏感性。
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