发布网友 发布时间:2024-10-14 02:06
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热心网友 时间:2024-10-14 02:15
以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗被称为His标签鼠单抗。其制备方法通常包括人工合成特定序列的多肽,即氨基酸序列为HHHHHH的多肽,根据需要在多肽末端添加用于偶联载体的特殊氨基酸。合成完成的多肽通过化学方法与载体蛋白(如KLH、BSA、OVA等)偶联,随后将偶联后的全抗原免疫实验小鼠。免疫过程结束后,通过无菌方式取出免疫成功的小鼠的脾脏,与骨髓瘤细胞进行融合。通过ELISA或其他筛选手段,从融合细胞中筛选出阳性克隆。筛选得到的细胞经过进一步克隆化,形成稳定的细胞株。将这些细胞株在体外培养或小鼠体内诱导产生腹水,然后从培养基或腹水中纯化,即可得到His标签鼠单抗。最后,使用Western blot或其他方法进行鉴定以确保其有效性。热心网友 时间:2024-10-14 02:16
以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗被称为His标签鼠单抗。其制备方法通常包括人工合成特定序列的多肽,即氨基酸序列为HHHHHH的多肽,根据需要在多肽末端添加用于偶联载体的特殊氨基酸。合成完成的多肽通过化学方法与载体蛋白(如KLH、BSA、OVA等)偶联,随后将偶联后的全抗原免疫实验小鼠。免疫过程结束后,通过无菌方式取出免疫成功的小鼠的脾脏,与骨髓瘤细胞进行融合。通过ELISA或其他筛选手段,从融合细胞中筛选出阳性克隆。筛选得到的细胞经过进一步克隆化,形成稳定的细胞株。将这些细胞株在体外培养或小鼠体内诱导产生腹水,然后从培养基或腹水中纯化,即可得到His标签鼠单抗。最后,使用Western blot或其他方法进行鉴定以确保其有效性。