遗传毒性试验实验方法
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发布时间:2024-10-14 03:49
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时间:2024-11-02 03:40
遗传毒性试验方法近年来随着分子生物学的研究不断进步,检测手段也日新月异。目前,已知的遗传毒性短期检测方法超过200种,主要分为4类:基因突变检测、染色体畸变检测、染色体组畸变检测和DNA原始损伤检测。
传统的组合试验方法依赖于多种检测方法,因为单个方法可能只能反映一两个遗传学终点,所以通常需要配合使用。尽管有众多检测方法,但真正经过验证、具有理想灵敏度和特异度的可能不足10种。在体内诱变试验中,若发现1个或以上试验结果为阳性,通常会进行生殖细胞遗传毒性测试。
基因突变检测方面,Ames试验是常用手段,通过增加特定菌株如YG7014,可以提高对特定化合物的敏感性。TK基因突变试验则能检测多种遗传改变,如点突变和基因组重组。转基因小鼠基因突变试验可整体评估基因突变,包括生殖腺等不同组织,如MutaTM小鼠、Big-BlueTM小鼠等。反向*性酶切位点突变分析法(iRSM)具有高灵敏度和快速性,但仅适用于特定类型的DNA突变检测。
在染色体和染色体组畸变检测方面,微核试验是基础方法,包括体外和周围血微核试验,以及胞质*阻滞法微核试验。染色体畸变试验采用FISH技术,可以观察染色体结构和数量的变化。荧光原位杂交(FISH)技术尤其适用于精子非整倍体检测。
最后,DNA原始损伤的检测方法如单细胞凝胶电泳技术(SCGE),可检测活细胞和死亡细胞DNA的损伤,灵敏度极高,适用于评价遗传毒性损害。