实验笔记丨Transwell实验检测细胞侵袭能力
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发布时间:2024-10-19 12:58
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时间:2024-11-28 22:11
Transwell侵袭实验是评估肿瘤细胞侵袭能力的常用方法。实验流程包含预处理Transwell小室、细胞铺板、实验执行及数据收集等步骤。在实验前,需在Transwell小室上铺上人工基质胶,比例为1:40,于细胞培养箱中培养2小时。孵育结束后,去除多余人工基质胶并使用纯培养基清洗,确保无残留。对细胞进行消化、计数后,将10万个细胞铺于Transwell小室内,外部加入带有血清的完全培养基以促进细胞迁移。根据细胞的迁移情况,可在24-48小时后取出Transwell小室,进行后续处理。取出后,用PBS清洗并轻轻擦去未穿过去的细胞,固定并染色,最后在显微镜下观察结果。实验过程中,1×磷酸缓冲盐溶液用于清洗,Transwell coating buffer用于人工基质胶的配制,终浓度为0.1%的结晶紫染色液用于染色。
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