糖苷酶专题(四)肝素裂解酶

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热心网友时间：2024-10-21 13:35

肝素裂解酶，亦称肝素酶，专门裂解氨基己糖和糖醛酸之间的糖苷键。它能选择性地裂解肝素及硫酸乙酰肝素链，在非还原端产生双键，此键在232nm处有吸收，可用于检测寡糖和二糖样品。NEB提供三种肝素酶：细菌肝素酶I、细菌肝素酶II和细菌肝素酶III。酶I裂解高度硫酸化肝素/HS链，酶III裂解较低硫酸化HS链，而酶II则裂解肝素和HS上的高硫酸化及低硫酸化结构。三种酶联合使用，可使寡糖链几乎完全解聚为不含肝素/Hs的二糖。

细菌肝素酶I，基因源自埃氏拟杆菌，能裂解肝素和硫酸乙酰肝素，反应产物含不饱和糖醛酸，可在232nm处用紫外吸收光谱检测。它在N-硫酸化的氨基己糖和2-O-硫酸化的艾杜糖酸或2-O-硫酸化的葡糖醛酸残基间切割。2-O-硫酸化的糖醛酸残基对于酶的活性至关重要，而GlcNSO3的6-O-硫酸化不会影响其活性。然而，酶对猪粘膜肝素的作用有限，导致肝素寡糖仍呈现低硫酸化。

细菌肝素酶II，基因源自埃氏拟杆菌，是一种低特异性酶，能裂解肝素及硫酸乙酰肝素。其反应产物含不饱和糖醛酸，同样可在232nm处用紫外吸收光谱检测。此酶切割N-硫酸化的葡萄糖醛酸或艾杜糖醛酸残基之间的糖苷键。单独使用时，几乎不会产生多糖链的完全解聚，但与酶I和III联合使用时，二糖的含量增加。

细菌肝素酶III，基因同样源自埃氏拟杆菌，作用于肝素和硫酸乙酰肝素。其反应产物含不饱和糖醛酸，同样可在232nm处用紫外吸收光谱检测。此酶能够裂解氨基己糖与艾杜糖醛酸或葡萄糖醛酸残基之间的糖苷键，且存在6-硫酸化时具有活性。