凯氏定氮法操作
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发布时间：2024-10-16 11:00
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时间：2024-12-04 06:22
凯氏定氮法是一种广泛使用的氮元素定量分析方法，其操作流程主要包括样品处理、消解和蒸馏三个步骤。
在样品处理阶段，首先需要精确称取一定量的固体、半固体或液体样品，将样品移入干燥的定氮瓶中，加入硫酸铜、硫酸钾和硫酸，然后斜支于石棉网上小火加热，直至样品炭化。待泡沫停止后，继续加热至液体呈蓝绿色澄清透明，再加热0.5小时，最后冷却并加入水，移入容量瓶中混匀备用。
接着进行试剂空白试验，与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸按相同方法操作。
消解阶段是凯氏定氮法的关键步骤，一般温度设在240度及以上，快速消解可适当提高温度甚至用最大温度。将定氮装置装好，于水蒸气发生器内加入甲基红指示剂、硫酸和玻璃珠，控制加热煮沸。
在蒸馏阶段，首先在接收瓶中加入硼酸溶液和混合指示剂，将消化液由小玻璃杯流入反应室，加入氢氧化钠溶液，控制蒸气通入反应室，使氨通过冷凝管进入接收瓶。蒸馏5分钟后移动接收瓶，再蒸馏1分钟，用少量水冲洗冷凝管下端，最后取下接收瓶，用硫酸或盐酸标准溶液定至终点。
整个凯氏定氮法操作流程在实验室中已经逐步被消煮仪处理方法取代，该方法更安全、可操作性强，一次可处理多个样品。消解温度通常设在240度及以上，快速消解可通过适当提高温度实现。这一现代化方法已成为凯氏定氮法的首选处理方法。
扩展资料
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
