发布网友 发布时间:2024-10-15 08:17
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热心网友 时间:2024-10-22 19:15
以下是牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的详细配制步骤:
首先,根据配方精确称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl。牛肉膏需挑取后放在小烧杯或表面皿中,用热水溶解,若使用称量纸,可快速称量后直接溶于水中,注意分离称量纸。蛋白胨易吸潮,称取时动作要快,避免混杂。每种药品使用专用工具,确保清洁。
在烧杯中加入适量水,用玻棒搅拌,然后在石棉网上加热溶解。待所有成分完全溶解后,补足所需的总体积。若制备固体培养基,先将称好的琼脂加入溶化的溶液中,边加热边搅拌,防止琼脂烧杯底部烧焦。最后补足水分。
在调节pH值前,先用pH试纸测量原始值。如果偏酸,用1mol/L NaOH滴加并搅拌,直到pH达到7.6。若pH过高,则用1mol/L HCl进行调整,注意不要过度调节。对于需要精确pH的微生物,可使用酸度计。
趁热过滤培养基,如果不需要,此步骤可以省略。接下来,根据实验需求分装培养基:液体分装至试管高度的1/4,固体分装不超过管高的1/5,制成斜面;半固体分装至试管高度的1/3,垂直待凝。确保不沾染管口或瓶口。
装好后,用棉塞封口,防止污染,同时保持通气。用麻绳捆绑并包裹棉塞和培养基,注明名称、组别和日期。三角烧瓶同样处理,便于使用时解开。最后,将培养基高压蒸汽灭菌1.05kg/cm²,121.3℃,20分钟,如需暂存,放入冰箱。
待培养基冷却至50℃左右,搁置斜面,不超过试管总长的一半。然后在37℃温室中培养24-48小时,检查灭菌效果是否彻底。
这是一种应用十分广泛的天然培养基,其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐