DNA测序高通量测序技术

发布网友发布时间：2024-10-19 08:37

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热心网友时间：2024-11-15 20:15

高通量测序技术，简称高通量测序或下一代测序技术，其特征在于能同时测定数十万至几百万条DNA分子，并且通常具有较短的测序读长。这一技术的发展历程中，涌现出了多种不同的测序方法，如大规模平行签名测序（MPSS）、聚合酶克隆（Polony Sequencing）、454焦磷酸测序、Illumina（Solexa）测序、ABI SOLiD测序以及离子半导体测序和DNA纳米球测序等。

MPSS，由Lynx Therapeutics公司早期开发，是新一代测序技术的先驱，基于磁珠和接头连接，主要用于转录组测序，研究基因表达。然而，由于其序列偏好性和可能导致特定DNA序列丢失的特性，以及操作复杂性，MPSS逐渐被淘汰，取而代之的是更为先进的技术。Lynx Therapeutics后来与Solexa合并，被Illumina收购。

Polony Sequencing是哈佛George Church实验室在2005年开发的，基于乳化PCR和自动显微镜，被整合到ABI公司的SOLiD测序技术平台中。454焦磷酸测序则是454公司研发的并行焦磷酸测序技术，通过在油溶液中进行DNA扩增和信号检测，每个水滴中只允许一个DNA模板分子进行扩增，形成独特的信号，从而读取DNA序列。

Illumina的Solexa测序采用可反转的染料终止法，DNA模板连接到固体介质上的引物上，通过逐个添加四种ddNTPs进行单碱基延伸，与454的焦磷酸测序相比，其读长和单碱基消耗处于两者之间。