转座子标签基因的分离和克隆

发布网友发布时间：2024-10-19 01:55

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热心网友时间：2024-10-25 13:06

Southern-based基因分离与克隆技术，通常用于转座子标记基因的操作。通过杂交获得纯合突变株，构建基因文库，利用转座子探针筛选目标基因。然而，Mu元件等高效转座子可能导致大量拷贝，使得Southern分析变得复杂，需通过多次杂交减少插入序列数量。为解决这一问题，反向PCR方法应运而生，如Souer等人的方法，结合反向PCR和差别筛选，可以从高拷贝转座子中分离基因，并加速低拷贝标签基因的分离。TAIL-PCR分离法，如刘耀光等人采用的热不对称交错PCR，能特异性扩增转座子插入位点，具有高效、快速和灵敏等特点，已成功应用于多个物种。另一方法是AIMS，由Gierl等开发，基于插入突变位点扩增，能直接从玉米Mu元件系统中分离基因，但扩增产物的大小限制了其应用。尽管如此，这些技术都为转座子标签基因的分离提供了有效手段，但仍需不断优化以提高效率和减少复杂性。

扩展资料

转座因子或转座子是一类在很多后生动物中（包括线虫、昆虫和人）发现的可移动的遗传因子。一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来，环化后插入另一位点，并对其后的基因起调控作用，此过程称转座。这段序列称跳跃基因或转座子，可分插入序列（Is因子），转座（Tn），转座phage。