发布网友 发布时间:2024-10-23 04:37
共1个回答
热心网友 时间:2024-12-06 18:42
GFP单抗的制备过程通常涉及小鼠作为宿主,其基本原理与常规蛋白质单抗的生产相似。首先,科研人员会通过重组技术表达GFP蛋白作为抗原,或者人工合成GFP片段偶联到载体蛋白上,以提高免疫反应的特异性。接着,将GFP抗原免疫小鼠,得到免疫反应后的小鼠脾脏细胞,再与骨髓瘤细胞(如SP2/0细胞)融合。经过体外选择性培养、筛选阳性克隆、亚克隆稳定化以及大规模细胞培养或腹水诱导,最终从培养基或腹水中纯化出GFP单抗。经过ELISA和Western blot(WB)验证其纯度和活性后,该单抗即可用于实验。例如,Proteintech Group公司生产的GFP单抗(产品编号:66002-1-Ig)在Western blot实验中表现出良好的性能,如图所示,该单抗在常规实验中稀释20000倍仍能有效识别带有GST标签的GFP融合蛋白。