蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (六)
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发布时间:2024-09-26 16:54
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热心网友
时间:2024-11-26 09:22
13、高级功能:Z-Stack、Tiles、Time Series(该篇目之前的流程每次都要做)
(1)Z-Stack
Z-Stack 是一种 3D 成像技术,有两种模式:首先是通过“First / Last”模式确定 Z 轴范围,其次是“Center”模式,通过设定中间位置和 3D 厚度来决定成像范围。
在进行 Z-Stack 拍摄时,需先选择感兴趣的通道,点击“Live”预览,并确定拍摄界面。在“Z-Stack”框中打开相关设置,调整拍摄范围,并按住 Ctrl 调整边界,点击相应按钮设置起始和结束位置。
软件会自动计算范围厚度,并复制到“Interval”设置拍摄层数。选择“Start Experiment”开始拍摄,完成后可拖动 Z-Stack 轴查看不同层面的信号。
使用 Best signal 建立多个 track 时,可在 Z-Stack 成像时选择“Switch track every ‘Z-Stack’”提高成像速度,但该方法不适用于快速变化的样品。
完成 Z-Stack 后,可选择直接叠加所有层面或处理成 3D 图像。叠加所有层面时,可分屏查看信号通道图像或每个层面的图像,进行最大强度投影或生成二维图像。
3D 图像可通过选择“3D”模式呈现,并拖拽查看。如需拍摄某个角度的画面,可点击“Create Image”,生成视频则可在软件中实现,选择“Series”可视化,设置旋转角度和帧数,生成视频文件。
视频导出时,选择“Fixed Duration”设置帧率,选择导出位置,点击“Apply”应用。