分子互作技术

分子互作是生命体普遍存在的现象，其研究对于揭示生命活动的本质具有重要意义。分子互作主要分为核酸与核酸互作、核酸与蛋白互作、蛋白与蛋白互作三种类型。随着科技的发展，尤其是后基因组时代的深入，高通量筛选生物标记物和寻找生物关联分子变得可能，对分子互作技术的应用提出了更高要求。金开瑞作为专注于分子...

科研新人在探索分子机制时，需掌握众多实验技术来验证理论。除了经典方法如qPCR和Western Blot，现代科研正日益倾向于采用新方法。本文将详细介绍“直接机制”中常见的五种分子互作实验，以帮助理解其原理和应用：蛋白质-蛋白质互作：免疫沉淀（IP）和免疫共沉淀（co-IP）是关键。IP通过抗体捕获，co-IP则在...

蛋白间相互作用是生命现象的基础，研究这些相互作用能揭示生物反应机制和生命本质。大部分蛋白通过相互作用或复合物形式发挥功能。分子互作研究技术正不断发展。传统方法如酵母双杂交、ELISA、FRET、CO-IP、western blot 和MS，主要用于检测蛋白相互作用，但操作繁琐、耗时且多为定性检测。新型生物物理技术，如...

Biacore，基于光学表面等离子共振原理，用于分子互作分析的实验方法。核心组件包括微流控系统，SPR光学组件和金膜芯片。适用于研究全内反射条件下，入射光造成金层等离子体共振，导致反射光在特定角度能量降低的现象。SPR角对折光率变化非常敏感，结合/解离造成金膜附近折光率实时变化，Biacore记录这一现象。Biac...

选择适当的表达宿主与条件，确保目标蛋白表达与纯度达到最优。优化融合蛋白与样品的反应条件，以确保最大化的蛋白质相互作用。合理选择与优化亲和纯化步骤，如树脂选择与洗脱条件，以保证高效纯化。执行负对照实验，验证Pull-Down结果的特异性与可靠性。结合质谱等技术进行结果确认与分析，确保数据的准确性。结...

（4 ）、利用ChRIP 实验可研究circRNA 与蛋白质或DNA 之间的互作。技术流程 （1）、ChRIP-RNA：探针设计与合成→细胞交联→细胞裂解、超声处理→探针杂交→复合物纯化→RNA回收与纯化→NGS或qRT-PCR检测；（2）、ChRIP-DNA：探针设计与合成→细胞交联→细胞裂解、超声处理→探针杂交→复合物纯化→...

SPR技术通过金属表面结合的配体的量或是否结合配体产生不同的共振角，以此确定配体与Analyte结合的状态和Ka(热力学亲和常数)。以上所说的金属表面通常是商业化的传感芯片，包括CM52,CM4,CM3芯片，用于蛋白、肽段、小分子等；CM7用于小分子化合物；SA芯片用于生物素标记的分子，如核酸、糖类等；Biotin CAP...

生物分子相互作用系统是一种用于生物学、农学领域的计量仪器，于2019年06月17日启用。生物分子互作技术(Biomolecular InteractionAnalysis)是基于SPR（Surface PlasmonResonance)原理的新型生物传感分析技术。传统的检测生物分子间相互作用的探针分子和目标分子亲和常数的方法如平衡透析法、光谱测量法、热量测定法、...

BLI（BIO-LAYER INTERFEROMETRY）技术，即生物膜层表面干涉技术进行精确检测。此技术用光纤制成的生物传感器底端覆盖了生物分子相容层，用来固定相互作用分子中的一个，形成生物膜层。相互作用发生时，生物层厚度增加，反射光干涉光谱曲线整体向波长增加方向移动。分子结合或解离时，都会导致干涉曲线的漂移。应...

BIAcore，以其光学表面等离子共振（Optical Surface Plasmon Resonance, SPR）技术为核心，已经成为分子互作分析领域的一颗璀璨明星。这项精准且重复性极高的技术，已被药典权威收录，为药物研发提供了强大的工具。SPR技术通过监测分子结合对介电常数的微妙变化，实现了对结合和解离过程的实时监测，从而揭示了...