干货分享 | 关于质粒提取的那些事儿

质粒提取并非简单操作，关键在于区分并提取chromosomal DNA和plasmid DNA。细菌的拟核结构和DNA特性是关键。提取过程一般包括菌体扩繁、裂解和分离纯化三个步骤，其中碱裂解法是常用方法，通过选择性地让chromosomal DNA变性，而plasmid DNA保持双链结构。在提取过程中，溶液Ⅰ的Lysozyme、EDTA、Glucose等成分各司...

作为广州吉赛生物科技股份有限公司的工作人员，我们深知环状RNA合成技术的复杂性和专业性。在环状RNA合成领域，有多家公司均表现出色，各自拥有独特的技术优势和丰富的行业经验。然而，要评价哪家公司，需要考虑多方面的因素，如技术创新能力、产品质量、客户反馈等。广州吉赛生物科技股份有限公司也在此领域有着深入的研究和丰富的经验，我们致力于为客户提供高质量的环状RNA合成服务。因此，选择环状RNA合成公司时，建议客户根据自身需求和实际情况进行综合评估，选择最适合自己的合作伙伴。环状RNA因独特的闭环结构而稳定性更强，作为线性mRNA的有效替代品，是下一代基因治疗开发的理想平台。吉赛生物拥有原创的环化专利技术，可实现RNA高效环化，制备的circRNA完整性好、纯度高、翻译表达能力强，可用于细胞转染、动物实验、药效评估...

收获裂解： 离心裂解细菌，使用试剂盒进行纯化操作，多次洗涤和离心。 最后通过电泳检测纯度。 质粒纯化： 使用乙酸钠溶液处理，再通过乙醇沉淀和洗涤得到纯化的质粒。 常见问题与解决方案 质粒提取问题： 得率低：检查菌体状况，调整裂解条件或筛选高拷贝菌体。 纯化不足：检查RNA...

在提取的质粒DNA纯化过程中，首先将提取好的质粒放入1.5ml离心管中，加入1/10体积的3mol/L无菌乙酸钠溶液，然后加入2倍体积的无水乙醇，放置于-20℃沉淀4-6小时或过夜。之后，在4℃条件下，使用高速离心机进行离心，弃去上清，并用70%乙醇洗两次。干燥后，加入200ul无菌水溶液，即得到质粒溶液。最后...

将细菌离心去除上清，加入RB和LB溶液，轻轻震荡使细菌裂解。接下来，用NB溶液中和，再次离心收集。然后，将裂解的细菌转移到吸附柱上，通过离心和洗脱步骤，逐步去除杂质。质粒的纯化工艺同样讲究细致。将提取好的质粒与3mol/L无菌乙酸钠混合，随后加入无水乙醇沉淀，低温静置。通过高速离心去除上清，再用70...

一、质粒提取之 Solution I、II、III：抽提质粒 DNA 常用碱裂解法，Solution I 用于抑制 DNase 活性，Solution II 用于溶解细胞释放 DNA，Solution III 用于沉淀蛋白及中和反应。二、核酸电泳之 TBE、TAE 和 MOPS 缓冲液：TBE、TAE 和 MOPS 是实验室中常见的缓冲液，其缓冲能力与应用场景有所不同。

PCR实验的关键在于精确的组分和反应条件。以下是PCR反应中不可或缺的几个元素及其重要性：1. 模板DNA：来源广泛，包括gDNA、cDNA和质粒DNA。起始量至关重要，过量可能导致非特异性扩增，过少则影响得率。拷贝数计算有助于确定最佳量，纯化处理是确保PCR成功的必要步骤。2. dNTPs：四种核苷酸（dATP、dCTP...

乳酸菌菌液 PCR 实验详解无需提取目的基因 DNA，也不必酶切鉴定，直接利用菌体热解后的DNA模板进行PCR扩增和鉴定，这是一种简便的菌落检测方法。乳酸菌菌液 PCR 主要用于确认菌落是否含有目标质粒，以下是详细步骤：从MRS平板上分离纯化菌种，通过多次划线培养直至得到单一纯菌。培养菌种后，取单菌落悬浮...

提取的水样层中RNA可以通过异丙醇沉淀进行还原，而除去水样层后的样品中DNA和蛋白也能以沉淀形式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇则能析出有机层的蛋白。这种共纯化DNA对于样品间标准化RNA产量非常有用。Trizol试剂适用于小量样品（如50~100mg组织，5×10^6细胞）以及大量样品（...

质粒转染：原理与应用的双赢 质粒转染的核心是利用载体物质携带DNA，通过膜渗透或融合，将外源基因导入真核细胞，从而实现基因表达调控。随着分子生物学的飞速发展，质粒转染已经广泛应用于基因功能研究、基因表达调控、突变分析和蛋白质生产等领域，成为研究者们的得力助手。方法多样，转染之路有高有低 质粒DNA...

深入探讨DNA转染技术，特别是质粒转染试剂的选择至关重要。在基因与蛋白研究领域，质粒转染是实验室常用的重要手段。质粒转染的基础和应用广泛，它利用载体物质将外源DNA导入细胞，促使基因表达，为研究基因功能和调控提供手段。方法多样，包括物理、化学和生物介导，其中载体转染法最为常用，尤其纳米生物材料类...