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革兰染色酒精脱色时间过长或过短

发布网友 发布时间:2024-09-30 06:56

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热心网友 时间:2024-11-02 22:25

革兰染色法中,脱色时间过长或过短会产生以下结果:
1. 如果脱色时间过短,那么阴性菌可能不会被充分脱色,导致它们被误染成阳性菌。
2. 相反,如果脱色时间过长,阳性菌可能会被过度脱色,从而被误染成阴性菌。
为了获得准确的染色结果,脱色时间通常应控制在20至30秒之间。
在革兰染色过程中,初染和媒染步骤会使细胞内形成不溶于水的结晶紫-碘大分子复合物。
革兰氏阳性细菌因其较厚的细胞壁、高含量的肽聚糖和紧密的分子交联,在乙醇洗脱时,肽聚糖网孔会因脱水而收缩,且基本不含类脂,因此结晶紫与碘复合物能够牢牢阻留在细胞壁内,使其保持紫色。
而革兰氏阴性细菌由于壁薄、肽聚糖含量低且交联松散,在乙醇作用下,肽聚糖网孔不易收缩,加之含有较高比例的类脂,乙醇会溶解类脂,导致细胞壁上出现较大缝隙,复合物容易溶出,因此经过乙醇脱色后,这些细菌会变得无色。
随后,使用红色染料进行复染,革兰氏阴性细菌会获得红色,而革兰氏阳性细菌仍保持紫色。
影响革兰染色脱色的因素包括:
1. 碘液:如果碘液放置时间过长或经日光照射失效,其媒染作用减弱,可能导致结晶紫与细菌结合不牢固,容易被脱色。
2. 结晶紫:结晶紫浓度过高可能会使染上的颜色不易被酒精脱色,可能导致革兰阴性菌被误染为革兰阳性菌。
3. 酒精:酒精作为脱色剂,革兰染色的脱色酒精浓度应为95%,在此浓度下,革兰阳性菌染上的结晶紫不易被脱去,而革兰阴性菌染上的结晶紫容易被脱去。然而,酒精浓度若降至70%,其脱色能力增强,可能会导致革兰阳性菌也被脱色,从而误判为革兰阴性菌。
以上内容改写自网络资料,旨在确保革兰染色法的正确理解和应用。
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