配制培养基的步骤

发布网友发布时间：2024-09-30 03:25

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热心网友时间：2024-10-13 13:18

1. 首先，向容器内加入所需水量的一部分，然后根据培养基的配方，依次称取各种原料加入其中并溶解，最后补足所需水分。对于蛋白胨、肉膏等物质，需要加热溶解，并在全部原料溶解后加水补足因加热而蒸发的水分。在配制固体培养基时，先将液体培养基煮沸，然后加入称好的琼脂并继续加热至完全融化，同时不断搅拌以防止琼脂糊底烧焦。
2. 调节pH值：使用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值。如果不符合要求，可以使用10%的HCl或10%的NaOH进行调节，直到达到配方要求的pH值为止。
3. 过滤：趁热使用滤纸、纱布或棉花将已配好的培养基过滤。使用纱布过滤时，最好将其折叠成六层；使用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上进行过滤。
4. 分装：已过滤的培养基需要进行分装。制作斜面培养基时，将培养基分装于试管中；制作平板培养基或液体、半固体培养基时，则将培养基分装于锥形瓶内。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
5. 加棉塞：分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。制作棉塞时，要选择普通新鲜、干燥的棉花，并将其铺展成适当厚度。制作好的棉塞应迅速塞入管口或瓶口中，并确保紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
6. 制作斜面培养基和平板培养基：培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。制作斜面培养基时，将试管头部枕在木条上使其自然倾斜；制作平板培养基时，将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，待培养基凝固后，将其倒置放置在恒温箱里，24小时后检查，如培养基未长杂菌，即可用来培养微生物。