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...蛋白质变性的主要因素,及如何在蛋白质分离纯化中减少其变性机会...

发布网友 发布时间:2024-09-30 04:19

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2个回答

热心网友 时间:2024-11-19 03:29

强酸,强碱,盐,高温,反复冻融是导致蛋白变性的主要因素。

蛋白分离纯化中注意:

(1)所用的缓冲液要注意调pH

(2)在分离纯化过程中保持低温

(3)纯化前处理菌液时,如His纯化,要在搅拌时缓慢加入缓冲液及氯化钠,防止蛋白局部变性。

(4)得到蛋白后最好分装,不要反复冻融,否则蛋白易变性,酶易失活。

热心网友 时间:2024-11-19 03:21

变性在这里并不恰当。我想你的意思是在分离纯化中保持蛋白的活性。
温度控制是很重要的,其一,蛋白酶在低温时往往是活性很低的,因此可以减少对我们蛋白的分解。其次,低温时微生物生长缓慢,也减少了微生物因素对蛋白的分解。
第三,一些蛋白质并不是十分稳定,时间长了就会趋向于疏水基团聚集而沉淀。‘
因此,低温,快速处理是非常重要的。
而变形,是只对蛋白质2、3、4级结构的改变而导致失去生物活性。例如尿素可以把蛋白质打成直链。
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