免疫荧光VS免疫组化

发布网友发布时间：2024-09-05 06:00

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热心网友时间：2024-12-01 05:50

免疫荧光和免疫组化是两种常用的免疫标记技术，它们在实验步骤上存在显著差异，但都旨在揭示组织中的抗原分布。以下是它们的详细对比：

免疫荧光步骤摘要
1. 固定与脱水：通过特定酒精梯度处理。
2. 组织透明：透明剂替换脱水剂，便于石蜡浸润。
3. 浸蜡与包埋：石蜡分3缸浸润，后包埋在蜡块中。
4. 切片与烤片：冷冻切片，确保组织与玻片融合，然后烤片处理。
5. 脱蜡与抗原修复：切片经过多步骤脱蜡，微波或特定温度下进行抗原修复。
6. 血清封闭与染色：包括血清封闭、一抗和荧光二抗染色，最后DAPI复染核。
7. 结束观察：干燥后封片，荧光显微镜下观察。

免疫组化步骤摘要

1. 备片：涂有APES的胶片，脱蜡，水化，预处理抗原。
2. 抗原修复：微波、高压锅或电炉煮沸三种方法。
3. 染色过程：包括过氧化物酶阻断、超级封闭、抗体孵育、酶标二抗聚合物孵育和底物反应。
4. 复染与封片：苏木素染色后，通过特定酒精和二甲苯步骤，最后封片。

相同点：两者都涉及组织处理、抗原暴露和标记，以识别特定的免疫反应。不同点在于免疫荧光更注重于快速、高分辨率的标记，而免疫组化则可能通过抗原修复提高染色的敏感性和特异性。