不含硫酸的TMB终止液

在ELISA实验中，以TMB（四甲基联苯胺）作为底物，其反应过程如下：首先，将TMB与过氧化氢脲溶液混合，HRP（过氧化氢酶）在此环境下发挥作用，催化反应生成蓝色的阳离子根。这个过程中，酶的催化活性至关重要。然而，当加入终止液时，情况发生了变化。终止液含有硫酸，其作用是直接破坏HRP酶的活性，使其...

5.酶联物，蓝色液体，主要成分为HRP标记羊抗人IgG抗体，含防腐剂，规格为6/12ml。6.20倍浓缩洗涤液，无色液体，主要成分为磷酸盐缓冲液和吐温-20，规格为15/50ml，使用前需按照1:19比例稀释。7.底物液TMB，无色液体，主要成分为TMB，规格为6/12ml。8.终止液，无色液体，主要成分为2MH2SO4，规...

包被100 ul，你的反应体系应该就是100 ul。除了封闭用150 ul，其余所有包括TMB都用100 ul没有问题。终止液可以只加50 ul，2M的硫酸足够强了。看你OD值下降了，主要原因应该就是抗原和二抗的量都加少了。由于有封闭这一步，你不用担心气泡带着抗原超过了100 ul体系，只要不超过150 ul就可以（当然...

题主是否想询问“什么底物加终止液后颜色变黄”？酶底物。人Calreticulin定量EIA试剂加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，会出现蓝色，加终止液，颜色变黄，在450nm处测OD值，Calreticulin浓度与OD值成正比。EIA试剂是将抗原、抗体的特异性免疫反应和酶的高效催化作用有机结合起来的一种...

TMB (=tetramethyl benzidine) 四甲基联苯胺 (=transmural breathing) 胸壁呼吸音, 透壁呼吸 (=trimethoxybenzoate) 三甲氧基苯甲酸酯

接着，稀释生物素化抗体并加入板孔，空白孔则加入抗体稀释液。再次在37℃避光下孵育60分钟，然后重复洗涤步骤。继续进行酶结合物的配置和加入，同样30分钟的孵育后，再次进行洗板处理。预热酶标仪，加入显色底物TMB，15分钟内避光孵育。最后，加入反应终止液，混匀后立即测量每个孔的OD450值，并保存数据。

接着，加入1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP，同样在37℃孵育1小时，再次洗涤板孔以清除未结合的抗体。显色阶段，向每个孔加入50μl TMB底物溶液，在室温避光环境下反应10分钟。反应结束后，加入50μl终止液（2mol/L H2SO4）停止反应。最后，使用酶标仪在450nm波长下测量每个孔的OD值，以此来确定...

重复洗涤和封闭步骤，然后用稀释的缓冲液准备标准品和样品。加入标准品和样品，室温孵育后再次洗涤。使用检测抗体、带HRP的二抗进行连续孵育和洗涤，最后加入TMB底物和终止液。最后，检测结果通过测量450纳米处的吸光度得出，需要注意控制孵育时间以保证准确的读数。这个流程确保了对特定蛋白质的精确检测和定量...

7. 底物液（TMB-过氧化氢尿素溶液）8. 终止液（2mol/LH2SO4溶液）9. 0.9%生理盐水 操作步骤如下：1. 包被过程：将抗原稀释至适宜浓度，每孔加入100μl，37℃下包被4小时或4℃下24小时。弃去液体，板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中。2. 封闭酶标反应孔：用5%小牛血清封闭40...

TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后,约40min显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2小时后即可完全消退至无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时...