亲和力检测

发布网友发布时间：2024-08-16 14:34

共1个回答

热心网友时间：2024-11-03 21:23

抗体在医疗应用前需对其关键特性，如滴度/效价、交叉反应、特异性及亲和力进行精确检测。针对可溶性抗原产生的抗体，常用方法包括放射免疫分析(RIA)、免疫放射分析(IRMA)、酶免疫分析(EIA)、荧光免疫分析(FIA)和化学发光免疫分析(CLIA)等。

在检测过程中，这些技术涉及的参数包括：总信号强度(T)、游离标记抗原(B)和结合标记抗原(F)的信号强度，以及非特异性结合和标准结合率(Bo%)。滴度/效价可通过配制不同稀释度样本，测量标记抗原-抗体复合物的信号比例(B/F)来确定，稀释倍数越大，抗体滴度越高。

交叉反应研究的是抗体对不同抗原的识别能力，无交叉反应抗体仅与免疫原的特定决定簇结合，而有交叉反应抗体则可能与相似抗原决定簇结合。交叉反应率(C%)通过比较待鉴定抗原和免疫原的ED50浓度来评估，C%越小，抗体特异性越高。

抗体特异性关乎其与抗原的匹配度，高度特异抗体能精确识别一个抗原决定簇。亲和力则衡量抗体与抗原结合的强度和稳定性，可用亲和常数(Ka)表示，Ka值越大，结合越稳定。对于多价抗体，其总的亲和力(avidity)应大于单价抗体的总和，反映结合的全面性和牢固性。