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反义RNA人工合成构建反义RNA

发布网友 发布时间:2024-08-07 05:17

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热心网友 时间:2024-08-17 23:42

在原核生物中,反义RNA的调控作用显著,人工合成非天然的反义RNA以调控特定基因的表达已经成为可能,并在多项实验中得到了验证。然而,由于对靶mRNA的SD序列上游区域结构知之甚少,设计出能与之结合的Ⅱ类反义RNA,以影响mRNA翻译,仍是一项挑战。


Ⅲ类反义RNA通过与mRNA的起始部位结合,形成ρ-不依赖性转录终止子,从而在转录层面抑制靶基因的表达。为了实现这一目标,需要在靶mRNA中寻找连续的U序列,设计出与之互补的反义RNA,确保它能形成ρ-不依赖性终止子,且理想位置应在5'端上游的非编码区域,以避免核糖体的干扰。


对于Ⅰ类反义RNA,一旦靶基因的核苷酸序列明确,就可以进行人工设计。有时候,设计出同时具有Ⅰ类和Ⅲ类功能的反义RNA,能提供更全面的调控效果。此外,反义RNA的反义设计,即设计出拮抗原反义RNA的反义RNA,可以抵消其对靶mRNA的抑制作用,从而增强或激活特定基因的表达。


值得注意的是,并非所有mRNA对相应的Ⅰ类反义RNA都敏感。一些寿命较短的mRNA,结合反义RNA的机会少,因此对抑制作用不太敏感。相反,稳定性高的mRNA则对反义RNA的抑制作用更敏感。反义RNA的稳定性在实际应用中至关重要,稳定性的反义RNA能更有效地调节靶mRNA的表达。


扩展资料

反义RNA,根据反义RNA的作用机制可将其分为3类:Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编码区,直接抑制翻译,或与靶mRNA结合形成双链RNA,从而易被RNA酶Ⅲ 降解;Ⅱ类反义RNA与mRNA的非编码区结合,引起mRNA构象变化,抑制翻译;Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录。

反义RNA人工合成构建反义RNA

在原核生物中,反义RNA的调控作用显著,人工合成非天然的反义RNA以调控特定基因的表达已经成为可能,并在多项实验中得到了验证。然而,由于对靶mRNA的SD序列上游区域结构知之甚少,设计出能与之结合的Ⅱ类反义RNA,以影响mRNA翻译,仍是一项挑战。Ⅲ类反义RNA通过与mRNA的起始部位结合,形成ρ-不依赖性...

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反义技术什么是反义技术

反义技术是一种独特的分子生物学手段,主要利用人工合成或构建的反义表达载体,产生特定长度的寡核苷酸片段,通常为15-30个核苷酸。这些片段通过碱基互补机制,干预基因的多个生命活动环节,包括解旋、复制、转录、mRNA剪接加工以及翻译等,从而调控细胞的生长和分化过程。反义技术的种类多样,例如反义DNA(as...

细胞生物学高频考点(二十二)之反义RNA与核酶内容及思维导图

1. 小分子RNA的功能与分类 - **snRNA**:存在于细胞核中,参与mRNA成熟过程,通过互补配对工作。- **scRNA**:存在于细胞质中,参与蛋白质合成和运输。2. 反义RNA的作用 - **反义RNA概念与功能**:与mRNA互补,抑制翻译,调控基因表达。- **反义RNA在科学研究中的应用**:人工合成反义RNA,...

关于反义RNA

ticRNA(transcription inhibitory complementary RNA)是大肠杆菌中CAP蛋白(cAMP结合蛋白)的mRNA的反义RNA。ticRNA的基因的启动子可被cAMP-CAP复合物所激活,从CAP mRNA的转录起始位点上游3个核苷酸处开始,以CAP mRNA的模板DNA链的互补链为模板,合成ticRNA。ticRNA具体长度不清楚,但是它是5'端一段正好和...

反义RNA设计反义RNA基因注意点

进一步的策略是将ribozyme结构附着在反义RNA的3'端,一旦反义RNA与靶mRNA结合,ribozyme便能激活降解靶mRNA的酶活性,强化抑制效果。为了增强反义RNA的作用,构建基因时需考虑剂量依赖性,选择强启动子以提高反义RNA的表达。串联多个反义RNA基因,形成多拷贝基因,也能提升其表达水平。同时,结合RNA酶Ⅲ的...

什么是反义表达载体?

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请问什么是有义(正义)RNA,反义RNA?

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反义技术的什么是反义技术

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