DNA提取试剂盒操作方法
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发布时间:2024-07-22 07:03
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热心网友
时间:2024-08-07 02:30
DNA提取试剂盒操作指南分为几个步骤,总计大约需要1小时,主要包括匀浆、细胞裂解、除蛋白和DNA纯化等。以下是详细步骤:
1. 匀浆和细胞裂解:
从动物组织:取1-100mg组织,研磨成匀浆,加入Solution A和RNase A1。如果是特定组织(如胰脏、皮肤等),需特别注意处理方法。
植物材料或植物细胞:根据材料种类,取适量研磨成粉末,加入Solution A和RNase A1,然后在65℃水浴中处理。
全血:加入Solution A和RNase A1,振荡后冰浴处理。
培养细胞:根据悬浮或贴壁细胞,分别用Solution A、RNase A1处理,然后进行洗涤步骤。
2. 除蛋白和纯化DNA:
加入Solution B和C进行离心、洗涤,去除上层有机相,保留水相DNA。
使用Spin Column进行进一步纯化,包括冲洗、洗涤和洗脱步骤,最后得到DNA。
如果实验室有负压装置,可以采用更为高效的方法吸走溶液。每个步骤都需要仔细操作,确保DNA的完整提取。