...在哪些方面?典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?
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发布时间:2024-07-22 11:10
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时间:2024-07-29 13:09
【答案】:(1)天然质粒存在着缺陷,必须对之进行改造构建:
①加入合适的选择标记基因,通常是抗生素基因。
②增加或减少合适的酶切位点,便于重组。
③缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。
④改变复制子,由严紧变为松弛型,以增加拷贝数。
⑤加装特殊的基因元件。
(2)DNA体外重组的基本过程:典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:
①目的基因的提取:供体生物基因或称外源基因的提取
②限制性酶切:目的基因切成不同大小的片段
③酶接:连接到另一DNA分子上(克隆载体)
④转化:将这个重组DNA分子转入受体细胞
⑤筛选和鉴定:对吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定
⑥基因表达:对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。[考点]质粒的构建和DNA重组实验的步骤。
...在哪些方面?典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?
⑤加装特殊的基因元件。(2)DNA体外重组的基本过程:典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:①目的基因的提取:供体生物基因或称外源基因的提取 ②限制性酶切:目的基因切成不同大小的片段 ③酶接:连接到另一DNA分子上(克隆载体)④转化:将这个重组DNA分子转入受体细胞 ⑤筛选和鉴定:对吸收了重组DNA的...
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