冷冻式巴氏涂片检测方法材料与方法

发布网友发布时间：2024-08-12 15:16

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热心网友时间：2024-09-11 23:47

在冷冻式巴氏涂片检测中，两种制片方法被采用：传统巴氏涂片和冷冻处理的巴氏涂片。以下是详细的步骤:

2.1 操作步骤

采集宫颈细胞时，使用专利采样器（ZL200420043365.4）在宫颈移行区进行标准化取样。采集后，迅速将细胞均匀涂抹在玻片清洁的一端2/3区域。随后，玻片放入细胞固定液中固定30分钟，确保细胞稳定。固定完成后，玻片被送至细胞病理室，随后置于细胞形态修复液中1至5分钟。经过修复处理，玻片被冷冻在冰箱冷冻层中，时间至少30分钟，甚至可以更长。

2.2 HE染色步骤

冷冻后的玻片先用流水冲洗1分钟，接着进行苏木精染色3分钟，然后用流水冲洗以去除染液。接下来，使用1%盐酸乙醇进行分化，再用清水冲洗，随后进行促蓝液返蓝处理。彻底冲洗后，用95%乙醇处理，再用伊红Y乙醇工作液染色，最后用无水乙醇、80%乙醇和95%乙醇进行清洗，用石炭酸二甲苯和二甲苯（I、II、III）进行脱色，最后用中性树胶封固，待其自然干燥后，送到细胞诊断室进行分析。

2.3 染色液配制

苏木精染液的配制至关重要，我们采用Harri's方法，取1g苏木精，10ml无水乙醇，20g硫酸铝钾，200ml蒸馏水，0.5g氧化汞和8ml冰醋酸。首先溶解苏木精和硫酸铝钾，加热混合，加入氧化汞，加热搅拌至深紫色，冷却后过滤备用。沉淀酸化伊红Y乙醇工作液的配制则需要20g伊红，500ml蒸馏水，10ml浓盐酸，沉淀后用95%乙醇配成饱和储存液。使用前，玻片需先在95%乙醇中浸泡1至2分钟。