怎样的恒温扩增技术可取代变温PCR?它的技术优势看这里

发布网友发布时间：2024-09-17 07:27

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热心网友时间：2024-09-29 09:07

近年来，等温扩增技术因其快速、高效和无需专用设备的特性，被认为是可能与PCR媲美的分子生物学检测手段。其中，LAMP、NERA、NASBA、RCA、HDA、RPA和ERA等技术各有特点和应用领域。

LAMP技术以其1-10拷贝目的基因在1小时内扩增100-1000倍的高效性，以及反应时间短、特异性强的优势，广泛用于病毒检测，如新冠病毒和流感病毒等。然而，对引物要求高且容易形成气溶胶，导致假阳性的风险是其不足。

NEAR技术，虽然速度最快5分钟可得结果，且灵敏度高，但短序列设计可能增加假阳性风险，成本相对较高。适用于快速检测，如Alere的ID NOW产品，但大规模样本检测仍依赖于PCR技术。

NASBA技术在41℃恒温下高效扩增RNA，具有较高的特异性和灵敏度，但反应成分复杂，成本较高，对DNA病毒检测适用性有限。

RCA技术，如滚环扩增，具有高灵敏度和特异性，尤其适用于单拷贝的核酸分子检测，但信号检测存在背景干扰。Qiagen和GE Healthcare的试剂盒在DNA测序和早期肿瘤检测中发挥作用。

HDA和RPA技术则因其操作简便和无需昂贵设备，适合基层实验室应用。HDA的研究尚不成熟，而RPA的便携性和快速性使其在兽医、食品安全等领域具有潜力。

虽然等温扩增技术各有优势，但与qPCR技术的互补性大于竞争性，两者在高通量中心实验室检测和即时现场检测中各有其位。未来，期待更多改进和创新，使恒温扩增技术在引物设计和多重检测方面更接近PCR的便利性。