技术分享 | 内参蛋白,你选对了吗?

发布网友发布时间：2024-09-06 18:09

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热心网友时间：2024-10-21 00:37

在分子生物学研究中，Western Blot（WB）是一种重要的工具，用于分析细胞或组织样本中特定蛋白质的表达水平。它通过特异性抗体对电泳处理样本染色，根据染色位置和强度判断蛋白表达情况，是入门实验技术之一。

在进行WB时，内参蛋白的选择至关重要。内参蛋白的作用在于标准化样本间的差异，确保蛋白表达量的比较准确。理想的内参蛋白应表达稳定，不受外部条件影响，常用的选择如管家基因驱动的蛋白，如β-actin、β-tubulin、GAPDH等。选择内参时，需要考虑样本的种属来源，目标蛋白的分子量，以及实验处理对内参表达的影响。

例如，哺乳动物样本通常选择β-actin、β-tubulin等，植物样本则用plant actin，核蛋白样本则需选用核内参抗体如Lamin A或Lamin B。在处理特殊样本或面对特定目的蛋白时，需要查阅文献指导选择合适的内参。内参蛋白的选择直接影响到WB结果的可靠性和准确性，如β-actin（细胞浆中丰富）、β-tubulin（微管蛋白，稳定）和GAPDH（糖酵解酶，表达恒定）等。

跑出一条清晰的内参条带是WB成功的关键，选对内参并确保蛋白定量准确，比如避免在血红细胞样本中使用常规内参，以及注意曝光时内参条带的控制。正确使用内参蛋白，是确保实验数据准确性和可比性的基础。普健生物提供优质的内参抗体，为您的实验助力。