芽孢染色染色方法
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发布时间:2024-09-27 06:48
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时间:2024-09-29 20:12
芽孢染色方法是微生物学研究中常用的染色技术,旨在清晰地显示芽孢在菌体中的位置。本文介绍了两种芽孢染色方法。
方法一涉及枯草芽孢杆菌的染色,首先将培养24小时的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌涂片、干燥、固定。随后滴加3至5滴孔雀绿染液于固定涂片上,并通过加热使染液冒蒸汽,约4至5分钟。加热期间需小心,避免染液蒸干或沸腾,以免破坏菌体或芽孢囊。倾去染液后,待玻片冷却并水洗至孔雀绿不再褪色,再用番红水溶液复染1分钟。最后干燥玻片,置于油镜下观察,可见芽孢呈绿色,菌体呈红色。
方法二使用两支洁净小试管,分别加入无菌水和蜡状芽孢杆菌、生孢梭菌菌苔,混合成浓厚菌悬液。随后在菌悬液中加入苯酚品红溶液,并在沸水浴中加热3至5分钟。使用接种环取混合液涂布于两片载玻片上,风干后用95%乙醇和自来水冲洗,滤纸吸干。最后,将黑色素溶液涂布于涂片处,自然干燥后,油镜下观察,可见菌体为白色,菌体内的芽孢呈红色。
在进行芽孢染色时,应注意选择适当的菌龄菌种,避免幼龄菌尚未形成芽孢或老龄菌芽孢囊破裂。加热染色时,需维持染液冒蒸汽的状态,避免菌体或芽孢囊破裂,同时确保芽孢能充分着色。