培养基制备过程中应注意哪些问题?

发布网友发布时间：2022-05-10 07:05

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热心网友时间：2023-11-18 14:07

不同的生物需要不同培养基，注意配方的选取，称取要准确，误差不能太大
对于特殊物品，不能灭菌的要用过滤方法除菌
配好后高温高压灭菌，可以在室温下放置很久，如果打开使用过一次，请放置冰箱
如果长时间不用，一定要重新配置，不能拿以前的用来培养，避免污染

热心网友时间：2023-11-18 14:08

在制备培养基时，通常要考虑以下因素：
(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长最佳pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7最好，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定最佳pH值，最好做一个简单的生长实验或特殊功能分析。
酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变*，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。
(2)缓冲能力碳酸盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在生理pH值条件下的缓冲能力差。
(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。
(4)粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响，在多数情况下，对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下，用羧甲基纤维素增加培养基的粘度，可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。

参考资料：生物秀