PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产物制取2ul
发布网友
发布时间:2022-05-10 01:00
我来回答
共3个回答
热心网友
时间:2023-10-15 22:26
电压一般130-140v,时间要依据你的PCR产物大小来确定了,一般500bp-5k之间的PCR产物可用20-30min即可分离开了。
溴酚蓝一般加在上样缓冲液中,量没有严格*,只要有颜色即可,它只是起到标记前沿的作用,溴酚蓝的位置大约相当于500bp左右的DN*段的迁移速率(在0.8的琼脂糖凝胶中)。
一般商品化的DNA marker(如Trans 2K)购买时都附赠有商品化的6X上样缓冲液,里面含有溴酚蓝,甘油等,可直接使用。
热心网友
时间:2023-10-15 22:27
先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer??
loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样。
电压80-150V都可以用,效果也都不错,其他电压不推荐,电压太高可能熔胶,电压太低跑太慢。 时间?看溴酚蓝位置,不要跑出胶就行。
热心网友
时间:2023-10-15 22:27
电压160V,时间不好说,具体得看跑到什么位置来定,大概5-6小时,温度60。溴芬蓝加不加影响不大。