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如何对含有碳酸氢铵,葡萄糖,尿素等培养基进行灭菌?

发布网友 发布时间:2022-05-10 01:59

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热心网友 时间:2023-10-18 11:59

湿热灭菌
培养基灭菌大多数用湿热灭菌。衡量热灭菌的指标很多,zui常用的是“热死时间”,即在限定的温度下杀死原有微生物中一定比例所需的持续时间。影响热灭菌的温度和时间的因素很多,包括:微生物种类、性质、浓度和培养基的性质、浓度等。
(1)连续灭菌
连续灭菌也叫连消,其温度一般以 126~132 ℃为宜,总蒸汽压力要求达到0.044~0.049 MPa 以上。中海培养基采用连续灭菌时,需在培养基进入发酵罐前,直接用蒸汽进行空罐灭菌(空消),用无菌空气保压,待培养基流入罐后,开始冷却。灭菌时对培养基的加热可采用各种加热器。培养基的冷却方式有喷淋冷却式、真空冷却式、薄板换热器式几种方式,其过程均包括加热、维持和冷却。
(2)间歇灭菌
间歇灭菌即实消,是在每批培养基全部流入发酵罐后,就在罐内通入蒸汽加热至灭菌温度,维持一定时间,再冷却到接种温度。实罐灭菌时,发酵罐与培养基一起灭菌。 其他灭菌设备一般采用蒸汽灭菌,如设备十分耐压,则可采用较高的温度,但必须注意设备内部的凹处及露出的小配管等蒸汽不能到达的部位。
高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在 24h 内完成灭菌工作。灭菌时一般是在 0.105MPa 压力下,温度 121℃时,灭菌 15~30min 即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。
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