RNAi技术介绍
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发布时间：2024-10-12 11:56
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时间：2024-10-14 00:39
该技术在基因功能测定、基因治疗等领域展现出巨大潜力。其独特优势包括：经济、快捷、高效的技术手段；基因沉默的特异性；抑制效率高，尤其在低等动物中可达90%以上；dsRNA长度限制性；浓度和时间双重依赖性；可传播性以及ATP依赖性。
RNAi技术在基因功能研究、抗病毒作用、转基因沉默机制研究、基因治疗等方面发挥着重要作用。通过设计针对特定基因序列的dsRNA来关闭或抑制基因表达，RNAi技术为研究基因功能提供了便捷途径，已广泛应用于各类生物体，包括线虫、植物、哺乳动物等。
siRNA设计需考虑序列专一性、选择有效靶位点、进行序列同源性分析，确保设计的siRNA与目标mRNA之间无同源性。获得siRNA的方法包括化学合成定制、体外转录法合成及非特异性siRNA合成等。
siRNA表达载体的使用克服了siRNA进入细胞后容易降解及作用时间短的问题，通过将siRNA对应的DNA双链模板序列克隆入载体的RNA聚合酶III启动子，能在体内持续表达所需siRNA分子，实现较长时间的基因沉默效果。
综上所述，RNA干扰技术以其独特优势在生物科学研究中展现出巨大潜力，成为功能基因组学研究的有力工具。在设计与实施RNAi实验时，需综合考虑siRNA或shRNA的选择、siRNA设计与合成、载体构建与表达策略等多方面因素，以确保实验的成功与高效。
