干货|qPCR反应中所使用的的探针类型,都在这里!
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发布时间：2024-10-03 18:29
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时间：2024-12-13 02:38
本文详细介绍了qPCR反应中常用的几种探针类型，包括：
1. 水解探针 (TaqMan或5'核酸酶)
这种探针由荧光标记的寡核苷酸组成，荧光基团（绿色）与淬灭基团（紫色）通过5'核酸酶的外切酶活性实现分离，产生荧光信号。图4展示了其工作原理。
2. 分子信标
分子信标探针形成发夹结构，通过目标结合导致荧光基团和淬灭基团分离，产生信号。设计难度相对较高，如图5所示。
3. 双重杂交探针 (LightCycler或FRET)
这种探针利用供体和受体荧光基团的FRET现象，当探针结合目标序列时，荧光信号由受体发出，如图6所示。
4. MGB探针 (Eclipse)
MGB探针在淬灭基团附近有额外结构，结合目标后通过MGB使荧光基团得以发光，见图7。
5. Amplifluor检测 (UniPrimer)
UniPrimer在扩增过程中，荧光基团在Z引物结合后释放，产生信号，图8展示了其工作原理。
6. 蝎子探针
此探针的一个引物含有发夹结构，结合目标后释放荧光信号，图9展示了蝎子探针的工作机制。
7. LUX探针
LUX探针的荧光基团在结合目标后解除淬灭，产生信号，图10展示其原理。
8. QZyme探针
QZyme探针包含一个底物，扩增后催化底物裂解，释放荧光信号，如图11所示。
9. LocNA探针
LocNAs通过亚甲基桥增加特异性，允许使用较短探针，见图12。
