实验室常用试剂、缓冲液的配制方法
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发布时间：2024-10-02 17:59
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时间：2024-11-06 23:25
1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)
配制此缓冲液，首先需要称量相应浓度的Tris（121.1 g Tris/HCl）置于烧杯中，接着加入800 ml去离子水并充分搅拌溶解。随后，依据所需pH值，按表中指示量加入浓盐酸调节。溶液定容至1 L后，进行高温高压灭菌，然后在室温下保存。注意，溶液需冷却至室温再调整pH值，避免温度变化影响pH值。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
此缓冲液的配制与1 M Tris-HCl类似，但需要称量181.7 g Tris置于烧杯中，并加入约800 ml去离子水，充分搅拌溶解。按需调节pH值至8.8后，将溶液定容至1 L，并进行灭菌与室温保存。
10xTE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)
TE Buffer的配制较为简便，将100 mM Tris-HCl与10 mM EDTA量取后置于烧杯中，加入约800 ml去离子水并均匀混合。定容至1 L后进行灭菌，然后在室温下保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)
此缓冲液的配制过程包括称量40.8 g NaOAc : 3H.O，加入约40 ml去离子水后搅拌溶解。随后加入冰醋酸调整pH至5.2，加去离子水至100 ml，并进行灭菌，室温保存。
PBS Buffer
PBS Buffer的配制需要称量137 mM NaCl、2.7 mM KCI、10 mM Na2HPO4和2 mM KH2PO4，置于烧杯中。加入约800 ml去离子水后充分搅拌溶解，再滴加浓盐酸调节至pH值7.4，最后定容至1 L。灭菌后在室温下保存。对于含二价阳离子需求，配方中可补充1 mM CaCla2和0.5 mM MgC2。
10 M醋酸铵
此缓冲液的配制涉及称量77.1 g醋酸铵，加入约30 ml去离子水搅拌溶解，加去离子水至100 ml，并使用0.22 μm滤器过滤除菌。在室温下保存。注意，醋酸受热易分解，不宜高温高压灭菌。
Tris-HCl平衡苯酚
苯酚的使用需谨慎，使用时应佩戴手套和防护镜，在通风橱中操作。平衡苯酚的pH值至7.8以上，操作包括先将液化苯酚加热至室温，然后在68℃水浴中使其充分融解。添加羟基喹啉至终浓度0.1%，并按比例与Tris-HCl混合，充分分层后去除上层水相。重复操作直至有机相pH值大于7.8，保存于棕色玻璃瓶中在4℃下避光保存。
苯酚/氯仿/异戊醇(25:24: 1)
配制此混合液，将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24: 1)混合均匀，移入棕色玻璃瓶中保存在4℃下。
5 M NaCI
此缓冲液的配制过程包括称取292.2g NaCI，加入约800 ml去离子水并搅拌溶解。加去离子水至1 L后，适量分成小份，进行灭菌后在4C保存。
10% (WV) SDS
称量10g高纯度SDS，加入约80 ml去离子水后68℃加热溶解。滴加盐酸调节pH值至72，定容至100 ml，室温保存。
2M NaOH
量取80 ml去离子水，称取8 g NaOH小心地逐渐加入，并搅拌直至溶解。加去离子水至100 ml，移至塑料容器中后室温保存。
2.5M HCl
在78.4 ml去离子水中加入21.6ml浓盐酸(11.6 M)，充分混合后室温保存。
20% (WV) Glucos
称取20 g Glucose加入80 ml去离子水后搅拌溶解，加去离子水至100 ml，高温高压灭菌后在4℃下保存。
其他缓冲液与试剂的配制方法包括称量、混合、调节pH值、定容、灭菌和保存步骤。每种试剂和缓冲液的配制都需遵循相应的规范和温度要求，确保实验的准确性和安全性。正确配制试剂和缓冲液是科学研究的基础，对实验结果的准确性和重复性具有关键影响。
