酵母人工染色体YAC标记基因
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发布时间：2024-10-01 18:38
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时间：2024-10-10 11:59
在基因工程中，酵母人工染色体（YAC）载体扮演着重要角色，其中最常见的是pYAC4。尽管酵母的天然染色体呈线性结构，YAC载体为了便于操作，通常是环状设计，并融合了大肠杆菌质粒的复制组件和选择标记，以实现其在酵母中的保存和繁殖。
YAC载体的核心组成部分是复制元件，包括自主复制序列（ARS）、着丝粒（CEN）以及两端的端粒（TEL）。ARS是必不可少的，它提供了DNA在酵母细胞内的双向复制信号。CEN确保染色体在细胞分裂过程中正确分配，如pYAC4采用的是酵母第四染色体的CEN。端粒序列则位于染色体末端，保护DNA免受内部核酸酶的降解，保持染色体结构的稳定性。
为了便于筛选和鉴定，YAC载体通常配备有标记基因，如营养缺陷型基因trp1、leu2、his3，以及尿嘧啶合成缺陷型基因ura3，以及抑制基因sup4。例如，宿主酵母AB1380的胸腺嘧啶合成基因带有赭石突变ade2-1。在基本培养基上，野生型酵母形成红色菌落，而带有sup4的YAC载体可以抑制ade2-1的突变效应，产生白色菌落。通过观察菌落颜色变化，科学家们能够识别出含有外源DNA片段的重组酵母细胞。
扩展资料
酵母人工染色体（Yeast artificial chromosomes YACs） YAC 人工染色体载体是利用酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的染色体的复制元件构建的载体，其工作环境也是在酿酒酵母中。酿酒酵母的形态为扁圆形和卵形，生长的代时为 90 分钟；含 16 条染色体，其大小为 225-1900kb ，总计有14×106 bp；具真核 mRNA 的加工活性。
