支原体DNA提取——德国MB Venor GeM Sample preparation Kit使用...

发布网友发布时间：2024-10-07 19:18

共1个回答

热心网友时间：2024-10-07 19:25

在探索细胞世界的微观世界时，确保实验数据的准确性和可靠性至关重要。研究表明，37%的细胞培养上清和几乎所有的混合细胞培养上清，都隐藏着可能抑制PCR反应的神秘物质。因此，对于支原体PCR检测，DNA提取是必不可少的步骤。

Introducing the Venor®GeM Sample preparation Kit by Minerva-Biolabs®

这款高效试剂盒，货号56-1010，专为解决细胞培养基中的PCR抑制问题而设计，规格为10次/盒，适用于1X 10^6 细胞/ml，最大500μl样本的DNA提取。它的存在，是为了提高支原体检测的敏感度、一致性和特异性，消除血清含量过高对PCR反应的干扰，以及避免酚红等物质可能产生的交叉反应。

该试剂盒的工作原理巧妙而高效，分为四步进行：细胞裂解、DNA吸附、污染物去除和DNA洗脱。这套无需酚/氯仿复杂步骤的快速流程，仅需30分钟就能为PCR实验准备出纯净的DNA模板。

操作指南

使用前，确保你的细胞样本尽快进行处理。对于富含蛋白的样本，可能需要额外的蛋白酶K处理。请注意，此试剂盒并不适用于提取真核细胞组织的DNA。

步骤如下:

在恒温仪上将缓冲液A1和A2与无水乙醇混合，预热至70℃。同样，将缓冲液E加热至70℃。
10秒涡旋混合200μl的样本与200μl调节液，然后在70℃下孵育10分钟。
接着，加入400μl吸附缓冲液，再次涡旋，然后转移到核酸纯化柱，离心后弃去液体。
重复使用缓冲液A1和A2，每次离心后弃液，最后以最大速度离心3分钟，再进行管内DNA的收集和洗涤。
最后，用60μl缓冲液E处理，2分钟后离心，纯净的DNA就准备好了，可以直接投入PCR实验。

注意事项

保持试剂盒的专一性，每批试剂请单独使用，避免交叉污染。严格遵循试剂的保质期，确保实验结果的准确性。遵循标准操作步骤，任何操作偏差都可能影响结果可靠性。为了验证结果的准确性和排除潜在问题，我们建议使用对照品进行实验。同时，切勿使用非推荐的酒精，以免影响核酸提取效率。缓冲液E的预热能显著提升核酸的提取质量。

通过严谨的DNA提取步骤和科学的使用方法，Venor®GeM Sample preparation Kit将助您在支原体检测中取得准确且可靠的实验数据。