cDNA全长扩增,RACE技术了解一下
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发布时间:2024-10-07 19:14
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时间:2024-10-21 20:47
RACE技术,全称为cDNA全长扩增快速扩增策略,是生物学研究中常用的技术,用于获取特定基因cDNA的全长或部分序列,特别是起始和结束序列,以深入了解RNA分子特性。
该技术基于PCR技术,通过反向转录和PCR步骤实现目标。首先,需要准备特定的cDNA模板,通过添加适配序列作为PCR引物的锚点,以便扩增未知序列。RACE主要分为5' RACE(针对mRNA的5'端)和3' RACE(针对3'端)两种类型,分别利用mRNA的5'或3'端特性进行操作。
5' RACE流程包括:反转录mRNA生成cDNA,然后在cDNA末端添加适配序列,利用模板转换技术进行PCR扩增。3' RACE则利用poly(A)尾作为锚点,同样进行反转录和PCR扩增。完整的RACE实验涉及RNA提取、已知序列设计、PCR扩增、产物处理和克隆测序等步骤。
基因特异引物的设计至关重要,需考虑长度、GC含量、Tm值等因素,并确保最终产物的特异性。在实验中,还需注意RNA质量,保证RACE的成功。实验产物通常需要先克隆再测序,以获得完整的基因序列信息。
cDNA全长扩增,RACE技术了解一下
RACE技术,全称为cDNA全长扩增快速扩增策略,是生物学研究中常用的技术,用于获取特定基因cDNA的全长或部分序列,特别是起始和结束序列,以深入了解RNA分子特性。该技术基于PCR技术,通过反向转录和PCR步骤实现目标。首先,需要准备特定的cDNA模板,通过添加适配序列作为PCR引物的锚点,以便扩增未知序列。RACE主要...
RACE是什么技术?
RACE是一种基因克隆技术,全称为Rapid Amplification of cDNA Ends,即cDNA末端快速扩增技术。RACE技术的基本原理是通过已知mRNA序列的部分信息,设计特定的引物,利用PCR技术扩增mRNA的5'和3'端未知序列,从而获得全长cDNA序列。这项技术由Frohman等人于1988年发明,并广泛应用于基因克隆和表达分析等领域。RA...
什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长序列?
就是末端扩增技术。包括5端扩增和3端扩增。一般需要用到一个含已知序列的接头,通过巢式PCR得到目的产物,然后克隆测序得到目的基因片段,组装后得到全长。通常5端难度较3端大。具体方法可参考相应的试剂盒。
生物实验中的RACE是什么技术?
RACE技术是生物实验中常用的一种技术,它的全称是Rapid Amplification of cDNA Ends,即cDNA末端快速扩增技术。RACE技术的主要用途是获取完整的mRNA序列,特别是那些通过常规方法难以克隆的mRNA全长。在基因克隆和表达分析中,常常需要知道基因的完整编码序列,以便进行后续的功能研究和表达调控分析。然而,很多...
RACE是什么技术?
RACE (rapid-amplification of cDNA ends) 是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,通过往两端延伸扩增,获得cDNA完整的3'端或5'端。http://baike.baidu.com/link?url=xeTGmRR7s57HYeMnz8s5tc9NK1Q1OpvEcRiWZzbu4gdD9P-oUkkcay87WzhmTsjIlf6mzScixIy6wmrN04srOa ...
急求RACE-PCR原理!!!
近年来发展成熟的cDNA末端快速扩增(RACE)技术为从低丰度转录快速获得全长 cDNA提供了一个便捷的途径。 cDNA 末端快速扩增 (rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术是一种基于mRNA反转录和 PCR技术建立起来的、以部分的已知区域序列为起点,扩增基因转录本的未知区域,从而获得mRNA(cDNA)完整序列的方法。简单的说就...
RACE PCR简介
RACE, 简称为快速扩增cDNA末端,是一种利用PCR技术快速克隆cDNA末端的有效方法。这项技术在基因结构、蛋白质表达以及基因功能研究中扮演着关键角色,它能够帮助科学家们获取cDNA的完整序列信息。完整cDNA序列的获取并非易事,传统上,研究人员需要通过文库筛选和末端克隆技术来实现。末端克隆技术起源于20世纪80...
RACE的原理是什么?它对获得目的基因有何帮助?
楼上说错了。RACE就是在RNA的5‘加上已知序列。这样PCR。一个引物在后加的序列上,另外一个在RNA中间的已知序列上,这样在做RT-PCR,可以得到RNA5’末端的序列
RACE发展简史
RACE技术发展至今,已成为一种高效快速的基因末端扩增方法。它以其简单、快速、成本低廉等优势,受到生物科研界的广泛重视。经典的RACE技术由Frohman等在1988年提出,通过RT-PCR技术,利用已知部分cDNA序列来获取完整cDNA的5'和3'端,包括单边PCR和锚定PCR。自提出以来,该技术经过不断改进和完善,克服了...
RACE技术的原理和操作方法?
cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术,主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5'...