Westernblot中Tween-20的作用是什么?应该怎么用

发布网友发布时间：2024-10-02 22:34

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热心网友时间：2024-12-14 06:42

1. Tween-20是一种非离子型表面活性剂，广泛应用于各种领域，如水包油乳化剂、溶剂、扩散剂、稳定剂、润滑剂和抗静电剂等。在气相色谱中，它还可作为固定液，最高使用温度为120℃，用于分离分析挥发油、脂肪酸酯、醇、酮和卤化物。
2. Tween-20具有复性抗原的作用，能有效提高特异性的识别能力。在Western blot实验中，使用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点，可以降低抗体的非特异性结合。理想的封闭剂应能封闭所有未结合位点，同时不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标位，也不与抗体或检测试剂发生交叉反应。
3. Tween-20可用于清除去污剂，其浓度不应超过0.3%（0.05%效果最佳）。如果牛奶封闭效果不佳，可以适当提高Tween-20的浓度。在WB洗液中，Tween-20的作用与BSA类似，为抗原抗体蛋白提供保护，同时由于其表面活性剂的特性（含有亲水的环氧乙烷基团），能减少抗体对抗原的非特异性作用，用于洗脱未结合的抗体，降低非特异性结合。通常在TBST洗液中，Tween-20的用量为0.5ml/L，不加SDS。
4. Western Blot是一种常用的实验方法，主要用于分子生物学、生物化学和免疫遗传学领域。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色的位置和深度，获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况信息。