关于酶标仪使用中,OD值和ABS值的文献总结
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发布时间：2024-10-05 00:18
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热心网友
时间：2024-10-27 13:11
##A(absorbance)是吸光度，其值为ABS,abs（吸光值）。
##T(transmissivity)是透光度，T与A的关系为-lg
##光密度（optical density），缩写为OD”，它包含A和T两种计量方法。
[公式] 是摩尔吸光(消光)系数。
根据比尔定律，吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。
当c的单位为g/L，b的单位为cm时，则 A = abc，比例系数a称为“克分子吸收系数”，单位为L/g.cm；而M（分子质量）乘a得到ε，即摩尔吸光系数。
当c的单位为mol/L，b的单位为cm时，则 A = εbc，比例系数ε称为“摩尔吸收系数”，单位为L/mol.cm。
[公式] 的物理意义是：当吸光物质的浓度为1 mol/L，吸收池厚为1cm，以一定波长的光通过时，所引起的吸光度值A.
ε值取决于入射光的波长和吸光物质本身吸光特性，亦受溶剂和温度的影响。
ε值愈大，基于该反应的光度测定法的灵敏度就愈高。
b是光程长度，单位为cm，通常的石英比色皿的光程为1cm，所以b=1cm。
酶标仪的光程长度是液面的高度，那么实际操作中是多少呢？这是困扰我用酶标仪做测吸光度实验的一个疑点。下面来仔细分析：
此为丁香园网友的回答，于是我去看了MD的酶标仪的参数：
【性能特点】
光栅式光谱发生器，连续波长200-1000nm，无需额外购买滤光片
可检测吸光度（Abs)和荧光强度(FI)。吸收度波长范围达200－1000nm, 荧光波长范围250－850nm, 步进波长1nm
可读取6、12、24、48、96和384孔微孔板。提供终点检测、动力学、单孔扫描和光谱扫描四种测读模式
内置专利PathCheck探头，可把微孔板光径转化为1cm比色皿光径，还可校正移液器。
用各种酶标板，如平底板、圆底板、锥形底板等都能得到准确的结果
利用先进的恒温虚拟盖技术，能控制样品舱内的温度
具有功能强大的数据分析软件SoftMax Pro
但我现在用的是Biotek的仪器，它有这个功能吗？
终于，查到了上图，还有结合Synergy H1 Operator's Manual中所提到的“Available read methods are endpoint, area scan, spectral scanning, and pathlength correction .”即，【可用的读取方法是端点，区域扫描，光谱扫描和路径长度校正】，得出了我使用酶标仪测吸光度值的、具有实际操作性的方法。而且所测的数值可以和分光光度计相通。
与此以来一版96孔，比分光光度计的1个比色皿效率高了极多，分光光度计用的久了确实有些累人。而且类胡萝卜素易分解，长时间的等待和放置会有影响。
