没人觉得疯不觉的基因是三天两觉的吗
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发布时间：2022-05-08 11:23
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热心网友
时间：2024-01-24 03:01
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白，两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物，我用的是来源于rabbit和rat的抗体，二抗则是不同荧光信号标记的，我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗（CHI抗体）同时孵育，然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索，我感觉一抗4度孵育过夜比较好，背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片，阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG，荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Br标记神经干细胞免疫荧光，二抗为FITC标记，想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可，还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的，为避免荧光分解，分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液，后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色，如果是用过氧化物酶做标记，就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用，目的是使DNA变性，让Br抗体能够充分地与已经掺入的Br结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色，如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗，呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清，以PBS冲洗后，在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体，应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色，结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号，阴性对照组也没有荧光，但是拿到荧光显微镜下看，我的阴性对照组一片绿，像非特异性染色，到底哪个结果才是真实的呢?
参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题，如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因，荧光显微镜没有问题，那就以共聚焦显微镜的结果为主。
如何推荐作者三天两觉
一个优秀的作家带给你的优秀的人物会重塑你的人生观、世界观和价值观，就像封不觉展现给我的那种疯狂，向往自由的气质。有这样一个作家，他以幽默、吐槽的轻快氛围来伪装韵味深沉的哲理。以玩世不恭、与世俗格格不入的怪人形象塑造一个孤独的英雄、天才。他的名字叫三天两觉。三天两觉，男，汉族，网络...
封不觉是哪个小说的主角
封不觉是《惊悚乐园》中的男主角。《惊悚乐园》是三天两觉编著的虚拟网游类小说，首发于起点中文网。惊悚乐园简介。《惊悚乐园》是三天两觉编著的虚拟网游类小说，首发于起点中文网。主要讲述以主人公封不觉为主导的各个人物通过一个名为惊悚乐园的超越维度的游戏在自己的生命中诞生了一条与常人生活轨道...
感觉 三天两觉的 书最好了呢
没有最好的书，而是要看你抱着什么心态去读。佛家讲因果报应，若看的人只想恶人迟早会糟报应，反而受其所累。《圣经》上说上帝是宽容的，会包容人的错误，若看的人因此觉得自己有点错误不必大惊小怪，反正神会宽恕我，一样会反受其害。其实并不是书害了人，而是人自作聪明。很多人把知识当作赚...
90后的你,目前有没有过三天像是过三年的感觉呢?
作为90的我来说当然有啊，我感觉这个现象不一定只发生在我们90后，其他年龄段的人也可能会出现这一现象。就像平时的我不太喜欢学习，疯狂的玩，一到快考试前三天的时候，为了不让他挂科，所以就整天疯狂的在背题，中午不睡觉，晚上熬夜到很晚，感觉特别的疲惫，仿佛这三天过的就像过了三年一样。其实出...
请教:"别人笑我太疯癫,我笑他人看不穿"的出处和下两句是什么?
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《爱的教育》里的一个故事!急!急!急!
到了校门口,觉得有人触动我的肩膀,原来这就是我三年级时候的先生,是一位头发赤而卷拢、面貌快活的先生。先生看着我的脸孔说: “我们不再在一处了!安利柯!” 这原是我早已知道的事,今天被先生这么一说,不觉重新难过起来了。我们好容易地到了里面,许多夫人、绅士、普通妇人、职工、官吏、女僧侣、男用人、女用...
压抑的快要疯了的说说
1.活得累是因为心里装了多余的东西，跟吃饱了撑的是一个道理。2.有些事藏在心里是莫大的委屈，话到嘴边又觉得无足挂齿不值一提。3.放弃并不是心血来潮，各种失望累积在一起，最终在沉默中爆发。没有声音，没有吵闹，就这么静悄悄的放弃了。4.这世界上根本不存在“不会做”这回事，当你失去了...
求鬼故事
第二天清晨,君正在睡梦中,突然被人摇醒,睁眼一看是阿茸。君还没睡够,就没好气地说:“干什么呀,天还没亮呢。” “君,小晶她,她不见了!” 什么,不见了?君吓了一大跳,“是去上厕所了吧,别大惊小怪的。” “不是”,阿茸很急的样子,“你看,她的床上凉凉的,衣服也不见了,而且被子也不见了。
人真有第九感吗???圣斗士星矢里就有啊!!??
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三天两觉 贩罪大家觉得写的怎么样!~个人感觉 作者写到后面把天一写成神...
个人感觉按照之前三天的叙述，天一的身份可能还不只是神的使者这么简单，我有看过一些帖子，貌似很多人都因为赌蛇这个关联点认为天一就是《鬼喊》中的古清，再返回头去看鬼喊的话我也觉得三天为古清这个臭小子作了相当多铺垫，不应该就会这么沉掉，这样看的话天一这个死变态应该有一个更大的秘密，现在...
