植物组织培养过程中具体消毒操作过程和技术?

发布网友发布时间：2022-05-16 20:50

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热心网友时间：2023-08-11 00:41

组培过程消毒一般就分材料去清洗、酒精处理、升汞处理（或是次氯酸钠处理）
主要看你的材料，材料很嫩很嫩的，且木质化程度低的话一般酒精处理阶段会省去。
清洗一般就洗洁精洗净表层灰尘，清水冲洗个把小时
之后就是在操作台上操作了，酒精处理阶段看材料木质化程度确定时间，一般就10-60S，处理好后及时用无菌水清洗，3-5次，
升汞处理的话一般是6-15m，也是看材料啦，比较干净的材料相对时间短一点，期间要一直震荡，处理好后无菌水清洗5-6次，OK了！酒精浓度75%，升汞0.1%，次氯酸钠一般5%和10%都可以。

热心网友时间：2023-08-11 00:42

消毒过程跟选取的培养物有关。种子的话，未开裂就用清水冲洗干净，在超净台上先用75％酒精浸泡不超过30s，之后放入0.1％升汞消毒5~15min，升汞的渗透性不强，所以可以较长时间的进行消毒处理，接着无菌水冲洗干净，然后剥开种子接种。其他的外植体一般是先用洗衣粉浸泡半小时到一小时，然后在流水下冲洗半小时到一小时，目的是将表面污垢清理干净，然后在超净台浸入75％酒精中消毒不超过30s，无菌水冲洗1遍，再放入0.1％升汞或5％次氯酸钠溶液中浸泡（次氯酸钠对外植体伤害较小，但渗透性强，效果较差，且易造成持续性伤害，升汞消毒效果好，渗透性弱，但对外植体伤害大，易造成外植体褐化），浸泡时要不断摇晃外植体，以免外植体上有气泡存在影响消毒效果，消毒时间控制在5~15min，视材料状况而定，然后用无菌水冲洗5次左右（一定要冲洗干净，否则残留的消毒液会持续损害外植体），用无菌吸水纸洗干净水分，最后接种。