组织培养育苗外植体需要怎样灭菌?

发布网友发布时间：2022-05-16 20:50

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热心网友时间：2024-03-02 00:18

取得外植体后必须进行严格的灭菌，这是因为外植体常常附有多种多样的微生物，这些微生物一旦被带进培养基，就会迅速滋生，使组织培养前功尽弃。在将各种微生物杀死或清除的同时，必须保持外植体的生活力。先用流动的自来水冲洗10～20分钟，脏的外植体用洗衣粉洗涤，或用毛刷、毛笔轻轻刷洗，去掉污物，冲洗后用滤纸吸干外植体的表面水分。在70%的酒精里浸泡15～30秒钟，用无菌水冲洗两次。然后用适当的药剂消毒，经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉和低浓度的氯化汞等。使用这些灭菌剂，都能起到表面杀菌的作用。具体使用的浓度和浸泡的时间因外植体的种类和药剂而定。如用2%～10%次氯酸钠水溶液浸泡3～15分钟。灭菌后立即用无菌水冲洗3～5次，洗去药液，用无菌滤纸吸干水分，准备分离。