如何对外植体进行表面消毒?
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发布时间:2022-05-16 20:50
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热心网友
时间:2023-08-13 17:42
植物组织培养中,外植体的消毒常 用到以下两种主要的消毒药剂:一是体 积分数为70%的酒精,二是质量分数为 2%〜10%的次氯酸钠溶液。外植体的 消毒流程如下。
1。清水冲洗
把外植体放在清水下冲洗,可以加 少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20分钟。
2。 酒精浸泡
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水 分后,放入体积分数为70%〜75%的酒 精中摇动2〜3次,持续时间不超过 30秒。
3。无菌水冲洗,将外植体取出,在无菌水中震荡冲
洗3次。
4。 次氯酸钠溶液浸泡
把外植体取出后用无菌吸水纸吸干 外植体表面的水分,放入2%〜10%的 次氯酸钠溶液中浸泡20分钟左右。
5。 无菌水清洗
取出后,在无菌水中震荡冲洗5次。
。注意:上述流程中,酒精起到表面消 毒的作用,次氯酸钠溶液的消毒作用更 强。这两种消毒剂的使用时间可根据外 植体的种类决定。
一般而言,芽尖等相 对幼嫩的组织消毒的时间要短些,而茎、 根的消毒时间可长一些。 总的原则是, 既要杀灭外植体表面的全部微生物,又 要避免损害和杀死外植体本身。除上述 的消毒剂外,过氧化氢溶液(10%,5〜15 分钟)和氯化汞溶液(0。
1%〜0。 5%,2〜 7分钟)也是很好的消毒剂。不过应该 注意的是,氯化汞溶液有毒性,消毒的时 候要格外小心。
热心网友
时间:2023-08-13 17:42
什么是外植体
从植物上弄下来的细胞、组织、器官,进行人工离体培养的部分我们都统称为外植体。
一般我们常做的还是以器官为主,像叶片、茎、种子、花茎都算,而细胞、组织这块我就不考量了,那块涉及到组培的高端层次,暂时不是我有能力摸索的。
说说消毒剂
消毒剂其实很多,只要能杀菌的都叫消毒剂,组培比较常用就3个,75%酒精、升汞、次氯酸钠。
重点是什么呢,它们又叫表面消毒剂,重点在于“表面”二字。它消毒的是材料的表面,所以一旦发生外植体有内生菌的情况,这些消毒剂是没有一点作用的。
因此这里小胡需要说说表面消毒剂的局限性。知道局限性后,我们才能根据这种局限性来改变我们的外植体。
1.只能表面消毒,对内生菌毫无卵用;
2.因为是液体,具有液体的表面张力,所以很多时候,植物表面很多不平整的地方,消毒液是接触不了的;
所以总结起来就是,消毒液接触不了的地方,就达不到消毒效果。
来说说解决办法吧
1.先看看外植体的不定因素在哪
小贴士:其实消毒液使用时间和使用浓度都很固定的,百度都能查到,有时不是一味的调整这两个变量就能提高消毒效果的
上述的消毒剂选择、消毒剂的使用浓度、消毒剂的使用时间、消毒剂如何搭配,这些其实都可以作为消毒的固定因素,但有时候成败往往决定于那些不定因素身上。
外植体最大的不定因素就是外植体本身,次要的就是你自己的操作了。
因此我们要重点说的就是外植体的选择和处理方法。
2.外植体的选择和处理
先提个问:为啥石斛兰这么难做,而多肉十二卷的成功率那么高,很多爱好者都能在家成功一些?
原因就是,生长环境的区别
兰科多生长在高温高湿的环境中,这种环境各类菌也是长得肥肥的,因此别看石斛茎秆光滑干净,上面带的菌可能多到你意想不到。