PCR为什么要杀菌消毒
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发布时间:2022-05-17 01:53
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热心网友
时间:2023-09-19 20:58
细菌是有DNA的,会对需扩增的DNA造成污染,影响纯度,后续的测定误差就不是可以想象的了。
PS:关于PCR
概述
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DN*段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
PCR原理
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
PCR步骤
标准的PCR过程分为三步:
1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA
2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。
3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量即增加一倍。如图所示:
现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。
参考资料:百度百科+高中生物知识
热心网友
时间:2023-09-19 20:58
是为了防止外源的DNA干扰。
PCR的特异性引物引导DNA的扩增,当有外源DNA时,扩增出的片段可能不是你所需要的,造成PCR扩增的污染。
热心网友
时间:2023-09-19 20:59
是为了防止外源的DNA干扰。
我们说DNA稳定只是相对于RNA来说,在高温、酒精这些条件下还是很容易被破坏的。
热心网友
时间:2023-09-19 21:00
避免了外源细菌的遗传物质的污染,因为扩增是没有特异性的,外源细菌遗传物质会造成目的基因扩增纯度不够,无法继续以后的测定。
热心网友
时间:2023-09-19 21:00
我认为主要是防止菌破坏试剂,杀菌后菌是死了,可它的DNA还在啊。
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