如何证实细胞膜上两个蛋白的位置关系

发布网友发布时间：2022-05-20 17:39

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热心网友时间：2023-08-28 03:42

证实两个蛋白在细胞膜上都有定位有许多种方法：
　　1，荧光报告基因：两个蛋白各自用荧光蛋白标记，比如GFP和RFP等，两者荧光光谱不可重叠，在共聚焦显微镜下在各自通道观察和merge后的图像分析，可见荧光重叠，即可证明共定位。
　　2，免疫荧光：要求两个蛋白都有抗体，或者带有不同的标签，如myc，flag等，然后用免疫组织化学的方法，做免疫荧光二抗双标，在共聚焦显微镜下，可以看到荧光共定位。
　　3，免疫电镜，同免疫荧光类似，二抗要用不同大小的胶体金标记的二抗，电镜下可以分辨是否共定位。
　　4，western：提取质膜后，用相应的抗体检测是否在质膜组分中可以同时检测到两种蛋白。