酵母双杂交系统有哪些优缺点

发布网友发布时间：2022-05-20 14:26

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热心网友时间：2023-09-04 06:45

1、高敏感性。原因：
①采用高拷贝和强启动子的表达载体，使融合蛋白过量表达；
②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物，之后又与启动子结合，此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定；
③通过mRNA使信号放大；
④检测的结果是基因表达产物的累积效应，可检测存在于蛋白质间的微弱或暂时的相互作用。

2、真实性。检测在活细胞内进行，作用条件与作用力无需模拟，在一定程度上代表细胞内的真实情况。
3、简洁性。融合蛋白相互作用后，减少了制备抗体和纯化蛋白质的繁琐步骤。
3、广泛性。采用不同组织器官细胞类型和分化时期的材料构建cDNA文库，能分析不同亚细胞部位和功能的蛋白质，适用于部分细胞质、细胞核及膜结合蛋白。