什么是染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation)?

发布网友发布时间：2022-05-17 08:14

共1个回答

热心网友时间：2023-10-14 15:48

与传统的EMSA技术相比，基于体内分析而发展的染色质免疫沉淀分析(Chromatin
immunoprecipitation
assay
kit,ChIP)技术能更加真实、完整地反映结合在DNA序列上的*蛋白，是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的最好方法。ChIP技术和芯片技术的结合有利于确定全基因组范围内染色体蛋白的分布模式以及组蛋白修饰情况。该技术主要应用于:1.组蛋白修饰研究
2.转录*分析
3.药物开发研究
4.有丝*研究
5.DNA损伤与凋亡分析。
Upstate公司最先开发出步骤优化简捷的商业化ChIP分析试剂盒，保证实验的准确性和可重复性，同时Upstate提供广泛可行的ChIP级别应用抗体。ChIP基本试剂盒和特定蛋白质ChIP级别应用抗体结合完成一个完整的染色质免疫沉淀分析。
ChIP技术的作用原理:
甲醛处理使蛋白质与DNA交联;
ChIP基本试剂盒组分:
ssDNA/Protein
A
agarose
ssDNA/Protein
G
Agarose
ChIP
Dilution
Buffer
Low
salt
wash
buffer
High
salt
wash
buffer
LiCl
Wash
Buffer
TE
Buffer
0.5M
EDTA
5M
NaCL
1M
Tris-HCl,
pH
6.5
SDS
Lysis
Buffer
(以上各组份也可分别购买)
超声波将染色质打断成一定大小;
通过抗体沉淀蛋白质-DNA交联复合体;
解除交联，纯化DNA;
PCR确定和DNA结合的蛋白量;